[发明专利]一种红细胞代用品的制备方法

权利要求书

1.一种红细胞代用品的制备方法，其特征在于，取消纯化红细胞内容物的步骤，用红细胞内容物直接聚合血红蛋白，具体步骤包括：

步骤一、取经过抗凝的血液离心后弃上清，并将悬浮于细胞上层的白细胞去除，用四倍体积的生理盐水将红细胞重新悬浮；

步骤二、配制pH为7.2～9.0的磷酸盐缓冲液；按照磷酸盐缓冲液与红细胞溶液体积比为0.8～1比1的比例，在搅拌条件下缓慢加入磷酸盐缓冲液，搅拌3～10小时后，用中空纤维柱以生理盐水进行洗涤，滤出物即为红细胞内容物；

步骤三、调整血红蛋白的浓度至10～60mg/ml，调pH值至7.8～8.5；用浓度为0.02～0.15mol/L的多醛基化合物溶液，按照血红蛋白与多醛基化合物的摩尔比为1比20～40的量，在搅拌条件下将多醛基化合物溶液加至血红蛋白溶液中，搅拌反应0.5～2小时；按照多醛基化合物与终止剂的摩尔比为1比10～80的量加入终止剂，搅拌反应3～20小时；

步骤四、采用超滤或是凝胶过滤的方法对终止的反应液进行换液，将缓冲液置换成生理液，去除小于100kDa的血红蛋白，得到红细胞代用品。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在所述的步骤一中，将重新悬浮的红细胞用生理盐水稀释到10mg/ml～70mg/ml之间，采用中空纤维柱进一步洗涤红细胞，直到血浆蛋白浓度小于0.5μg/ml。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤三中，在血红蛋白溶液中加有SOD和CAT，使酶活分别为0.8万～20万U/ml和3万～150万U/ml。