[发明专利]疫苗

说明书

发明领域

本发明涉及针对严重急性呼吸综合症冠状病毒(SARS-CoV)传染的疫苗及其在预防SARS中的用途。本发明还涉及生产这样的疫苗的方法。

发明背景

冠状病毒具有正义非节段单链RNA基因组，其编码包括结构蛋白E、M、N和S在内的至少18种病毒蛋白。冠状病毒的主要抗原S(刺突)蛋白是膜糖蛋白(200-220kDa)，其以从病毒包膜表面突出的刺突形式存在。它负责病毒附着于宿主细胞的受体和诱导病毒包膜与细胞膜的融合。S蛋白具有两个结构域：S1，其被认为涉及受体结合；和S2，其被认为介导病毒和靶细胞之间的膜融合(Holmes和Lai，1996)。S蛋白可形成非共价连接的均三聚体(寡聚体)，其可介导受体结合和病毒传染性。

2003年3月，分离出新的冠状病毒(SARS-CoV或SARS病毒)，其与严重急性呼吸综合症(SARS)病例有关。已经获得该新冠状病毒的基因组序列，包括Urbani隔离群(Genbank登记号AY274119.3和A.MARRA等，Science，2003年5月1日，300，1399-1404)和多伦多隔离群(Tor2，Genbank登记号AY278741和A.ROTA等，Science，2003，300，1394-1399)的基因组序列。

也已经辨别了SARS相关冠状病毒的另一株系，其不同于Tor2和Urbani隔离群。该冠状病毒株系来源于采集自罹患SARS的患者的支气管肺泡洗液的样品，记录编号为031589，并收集于河内(越南)French医院(WO 2005/056781和WO 2005/056584)。

发明概述

本发明提供免疫原性组合物，其包含免疫原性SARS冠状病毒S(刺突)多肽或者其片段或变体和水包油乳剂辅料。本发明还提供生产本发明免疫原性组合物的方法，所述方法包括将免疫原性S多肽或者其片段或变体与水包油乳剂辅料组合。

本发明还提供：

-用作药物的本发明免疫原性组合物；

-用于预防或治疗严重急性呼吸综合症或其他SARS-CoV相关疾病的本发明免疫原性组合物；

-本发明免疫原性组合物在制造用于预防或治疗严重急性呼吸综合症或其他SARS-CoV相关疾病的药物中的用途；

-预防或治疗严重急性呼吸综合症或其他SARS-CoV相关疾病的方法，所述方法包括将有效量的本发明免疫原性组合物给予有需要的个体；和

-用作疫苗的本发明免疫原性组合物。

附图简述

图1显示辅料对由Ssol多肽诱导的体液应答的影响。通过以3周的间隔肌内注射2次2μg Ssol蛋白(没有辅料(无辅料)或与50μg明矾或与50μL水包油乳剂辅料(GSK2辅料)关联)，对年轻成年BALB/c小鼠(8只/组)进行免疫。仅用所述敷料的每一种对两个对照组进行免疫。在每次注射3周后采集血清(分别为IS1和IS2)，并如Callendret等(Virology，2007，363：288-302)所述通过抗-SARS ELISA测量针对SARS-CoV天然抗原的特异性抗体应答。每只小鼠的滴度由黑点表示，平均值由水平条表示。实验的检测限由虚线表示。

图2显示辅料对Ssol多肽诱导的中和体液应答的影响。如上所述对年轻成年BALB/c小鼠(8只/组)进行免疫。按照Callendret等(Virology，2007，363：288-302)所述测量上一次注射3周后采集的血清的中和抗体滴度。每只小鼠的滴度由点表示，平均值由水平条表示。实验的检测限由虚线表示。

图3显示通过使用辅料调节BALB/c小鼠中由Ssol蛋白诱导的免疫应答类型。对在上一次免疫3周后采集的小鼠血清测量针对SARS-CoV天然抗原的特异性IgG1和IgG2a同种型滴度。每只小鼠所测滴度表示为点。对于对照组，对来自每组的血清的混合物测量滴度，并由菱形表示。实验的检测限由虚线显示。

图4显示辅料对叙利亚金仓鼠中由Ssol多肽诱导的体液应答的影响。在每次注射3周后(分别为IS1和IS2)和第二次注射3个月后(IS2bis)采集血清，并如图1中通过抗-SARS ELISA测量针对SARS-CoV天然抗原的特异性抗体应答。每只仓鼠的滴度由黑点表示，平均值由水平条表示。