[发明专利]快速制备和使用工程化组织和支架作为个体的植入物

权利要求书

1.制造个体工程化植入物的离体手术中方法，所述植入物基于作为由于患者中的组织缺陷或组织损伤而待生成的组织的拷贝基质的天然或合成支架，所述方法包括步骤：

(i)提供天然或合成的支架作为组织细胞生长的支持基质；

(ii)提供从待治疗患者获得的自体干细胞；

(iii)提供通过活组织检查而从待治疗的患者的缺陷性或受伤组织获得的健康细胞作为拷贝细胞；

(iv)用包含刺激干细胞并加速组织细胞重构的因子的组合物孵育步骤(ii)的干细胞制备物；

(v)将步骤(iii)的细胞制备物加载或注射到支架基质上或支架基质内；

(vi)在步骤(iv)的经预处理的干细胞制备物的存在下，将步骤(v)的经预处理的支架基质与组合物一起孵育，所述组合物包含(a)募集和增加干细胞的可获得性的天然因子，(b)促进干细胞或其祖细胞的分化的天然因子，和(c)步骤(iv)的因子；和

(vii)提供经如此处理的支架用于由外科医生植入到待治疗的患者中，

其中步骤(iv)-(vi)是在无菌条件下、在生物反应器室或层流柜中、在10至30分钟的期间进行的。

2.权利要求1的方法，其中用包含(a)募集和增加干细胞的可获得性的因子，(b)促进干细胞或其祖细胞的分化的因子，和任选地(c)刺激干细胞并加速组织细胞重构的因子的组合物预处理步骤(ii)的自体干细胞和/或步骤(iii)的组织拷贝细胞制备物。

3.权利要求1或2的方法，其中所述刺激干细胞并加速组织细胞重构的因子选自EPO和hGH。

4.权利要求1-3中任一项的方法，其中所述募集和增加干细胞的可获得性的因子选自G-CSF和GM-CSF。

5.权利要求1-4中任一项的方法，其中所述促进干细胞或其祖细胞的分化的因子选自TGFβ，VEGF，维生素C和维生素E。

6.权利要求1-5中任一项的方法，其中所述募集和增加干细胞的可获得性的因子是G-CSF，所述促进干细胞或其祖细胞的分化的因子是TGFβ，并且所述刺激干细胞并加速组织细胞重构的因子是EPO。

7.权利要求1-6中任一项的方法，其中所述干细胞获得自待治疗的患者的骨髓或外周血。

8.权利要求7的方法，其中所述干细胞是间质干细胞。

9.权利要求1-8中任一项的方法，其中权利要求1的步骤(vi)的孵育步骤包括加入源自自体外周血的单核细胞(PBMC)。

10.权利要求1-9中任一项的方法，其中权利要求1的步骤(iv)-(vi)与预安排患者而将支架植入到缺陷性或受伤的组织之内或之上同时进行。

11.权利要求1-10中任一项的方法，其中所述自体干细胞之前未通过单独的过程步骤被增殖。

12.权利要求1至11中任一项的方法，其中前述任一项权利要求中所述的不同的因子和/或不同的细胞是通过粘性凝胶样或胶样制剂或组合物被提供给支架的。

13.通过权利要求1至12中任一项所述的方法获得的支架用于制造植入物的用途，所述植入物用于愈合受伤的或缺陷性的组织，从而实现恢复原状。

14.权利要求13的用途，其中前述任一项权利要求中所述的不同因子和/或细胞的粘性凝胶样或胶样制剂或组合物被提供用于在缺陷性或受伤组织的所有的或某些所选择的位点处手术中原位处理新鲜植入的支架。

15.制备物或组合物用于制备药物的用途，所述药物用于在有或没有经植入的特定细胞生长支持支架时治疗患者中受伤的或缺陷性的组织从而实现恢复原状，所述制备物或组合物包含：

(i)新鲜制备的非增殖性自体干细胞，

(ii)刺激干细胞并加速组织细胞重构的因子，其选自EPO和hGH，

(iii)募集和增加干细胞的可获得性的因子，其选自G-CSF和GM-CSF，和

(iv)促进干细胞或其祖细胞的分化的因子，其选自TGFβ，VEGF，维生素C和维生素E。

16.权利要求15的用途，其中所述制备物或组合物或支架还包含来自待治疗的患者的缺陷性或受伤组织的健康细胞作为拷贝细胞，以及任选地自体PBMC。