[发明专利]含有甲酰基的多孔性载体、使用该多孔性载体的吸附体以及它们的制造方法

说明书

技术领域

本发明涉及各种吸附体，特别是治疗用(医疗用)吸附体和抗体医药品精制用吸附体。

背景技术

多孔性载体已被广泛用作各种吸附体，例如各种色谱法用吸附体及亲和吸附体。其中，亲和吸附体可以高效率地精制目标物，并且能够降低无用物的浓度，因此已越来越多地被用作医疗用吸附体和抗体医药品精制用吸附体。特别是，作为用于治疗风湿、血友病、扩张型心肌病的治疗用(医疗用)吸附体，受到关注的是将作为亲和配位体的蛋白质A固定化于多孔性载体而得到的吸附体(例如，非专利文献1、非专利文献2)。

另一方面，作为能够特异性地吸附、洗脱免疫球蛋白(IgG)的吸附体，备受瞩目的是将作为亲和配位体的蛋白质A固定化于多孔性载体而得到的吸附体(抗体医药品精制用吸附体)。作为将以蛋白质A为代表的各种亲和配位体固定化于多孔性载体的方法，可以从例如非专利文献3的表8.1和图8.15中所示的溴化氰法、三氯三嗪法、环氧法、三氟乙烷磺酰氯法等各种固定化方法中选择。其中，从安全性的观点、以及固定化反应的容易程度、能够使用可通过较容易的方法生产的蛋白质、肽等理由来看，工业上优选将多孔性载体的甲酰基与亲和配位体的氨基之间的反应应用于固定化。

作为向多孔性载体导入甲酰基的方法，可以列举通过过碘酸氧化法使具有连位(ビシナル)羟基的多糖凝胶氧化、从而在糖链上生成甲酰基的方法(以下简称为糖链开裂型)(例如非专利文献4)。通过该方法得到的吸附体具有配位体洗脱少的优点。

此外，还可以列举如非专利文献3的图8.15、或非专利文献5所示地，介由通过使戊二醛发生作用的方法、使环氧基开环得到的甘油基与过碘酸盐作用的方法等得到的各种间隔团导入甲酰基的方法(以下简称为间隔团型)。使用了上述含有间隔团型甲酰基的多孔性载体的吸附体，具有目标物吸附量较大的倾向。此外，在专利文献1中公开了下述制造方法：向多孔性粒子的环氧基中导入氨基糖，并在该氨基糖部分经氧化开裂而生成的甲酰基上固定化含有氨基的配位体。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开昭62-15300

非专利文献

非专利文献1：Annals of the New York Academy of Sciences，2005，Vol.1051，P635-646

非专利文献2：American Heart Journal，Vol.152(4)，2006

非专利文献3：亲和色谱法，笠井献一等著，东京化学同人，1991年

非专利文献4：Immunology，Vol.20，p1061，1971

非专利文献5：Immobilized Affinity Ligand Techniques，Greg T.Hermanson et al.，Academic Press，1992

发明内容

发明要解决的问题

然而，对于含有糖链开裂型甲酰基的多孔性载体而言，糖链会因强氧化反应而开裂，导致多孔性载体的强度变弱，可能难以在高线速下使用。另外，就抗体医药品精制用吸附体而言，具有对目标物抗体的吸附量小的倾向，难以高速地进行抗体精制。另一方面，对于含有间隔团型甲酰基的多孔性载体而言，如果甲酰基的导入量少，则在治疗过程中及精制目标物的过程中，可能发生亲和配位体洗脱而混入到患者血液或精制产品的情况，因此从安全性和纯度的观点来看不优选。

此外，虽然在通常的亲和色谱领域的文献(例如非专利文献3和非专利文献5)及活性化载体的产品目录中没有明确记载，但本发明人等发现：在专利文献1所述方法中，对多孔性粒子进行环氧化时，无论如何都会发生环氧基自动开环而副产甘油基的情况。这样，在使氨基糖发生氧化开裂而导入甲酰基时，由所述环氧基开环得到的甘油基也同时被氧化，从而会导入与间隔团型相同的甲酰基，可能使亲和配位体变得容易洗脱。

本发明是鉴于现有技术存在的上述问题而完成的，目的在于提供可以提高治疗和精制的安全性、实现高速化、并进一步提高精制产品的纯度的含有甲酰基的多孔性载体、使用该多孔性载体的吸附体、它们的制造方法、以及使用它们的精制方法。

解决问题的方法

为了解决上述问题，本发明人等进行深入地研究，结果完成了本发明。