[发明专利]SIRT4及其用途

权利要求书

1.一种评估SIRT4脂肪酸氧化抑制活性的方法，所述方法包括：提供包括SIRT4蛋白质、催化脂肪酸氧化的酶和底物的无细胞组合物，以及评估所述组合物中的脂肪酸氧化活性。

2.权利要求1的方法，其中所述底物包括脂肪酸。

3.权利要求1的方法，其进一步包括将测试化合物加入所述无细胞组合物中的步骤。

4.一种用于测量测试化合物针对SIRT4蛋白质的抑制性质的方法，其包括：

i）在催化脂肪酸氧化的酶和底物的存在下，使所述SIRT4蛋白质与所述测试化合物接触，

ii）测量在所述测试化合物的存在下脂肪酸氧化的测试速率，和

iii）使脂肪酸氧化的测试速率与在不存在所述测试化合物的情况下获得的脂肪酸氧化的对照速率比较，其中所述测试速率相对于所述对照速率的增加指示所述测试化合物的抑制性质。

5.一种用于测量测试化合物针对SIRT4蛋白质的刺激性质的方法，其包括:

i）在催化脂肪酸氧化的酶和底物的存在下，使所述SIRT4蛋白质与所述测试化合物接触，

ii）测量在所述测试化合物的存在下脂肪酸氧化的测试速率，和

iii）使脂肪酸氧化的测试速率与在不存在所述测试化合物的情况下获得的脂肪酸氧化的对照速率比较，其中所述测试速率相对于所述对照速率的降低指示所述测试化合物的刺激性质。

6.权利要求1、4或5中任一项的方法，其中所述测试化合物是小分子、抗体或核酸。

7.一种治疗或预防哺乳动物受试者中的脂肪酸氧化病症（FOD）的方法，其包括给所述受试者施用有效量的减少SIRT4蛋白质活性的试剂。

8.权利要求7的方法，其中所述FOD是肥胖、中链酰基辅酶A脱氢酶（MCAD）缺乏症、短链酰基辅酶A脱氢酶（SCAD）缺乏症、长链酰基辅酶A脱氢酶（LCAD）缺乏症、肉碱棕榈酰转移酶移位酶Ⅰ和II型缺乏症、肉碱酰基肉碱移位酶缺乏症、极长链酰基辅酶A脱氢酶（VLCAD）缺乏症、戊二酸尿症II、EFT缺乏症HMG肉碱转运缺陷（原发性肉碱缺乏症）、长链3-羟基酰基辅酶A脱氢酶（LCHAD）缺乏症、三功能蛋白质（TFP）缺乏症、2,4二烯酰基辅酶A还原酶缺乏症、3-羟基酰基辅酶A脱氢酶缺乏症（HADH）、电子转移黄素蛋白质（ETF）脱氢酶缺乏症、皮脂腺病或3-羟基-3-甲基戊二酰基辅酶A（HMG）裂解酶缺乏症。

9.权利要求7的方法，其中所述SIRT4水平在肝细胞中被调节。

10.权利要求7的方法，其中所述试剂是减少SIRT4表达的拮抗性核酸。

11.权利要求7的方法，其中所述试剂包括靶向SIRT4 mRNA的核酸或靶向SIRT4蛋白质的抗体。

12.一种评估测试化合物对SIRT4的作用的方法，所述方法包括：a）提供包括SIRT4和测试化合物的反应混合物；和b）评估SIRT4的脂肪酸氧化活性。

13.权利要求12的方法，其中所述测试化合物是小分子。

14.权利要求12的方法，其中所述方法对于各个来自化学文库的多个测试化合物重复。

15.权利要求12的方法，其中所述反应混合物在真核细胞中提供。

16.权利要求15的方法，其中所述细胞是肝细胞。

17.权利要求12的方法，其中所述反应混合物在哺乳动物受试者中提供。

18.一种在哺乳动物受试者中诱导重量增加、脂肪酸沉积或治疗脂营养不良的方法，其包括给受试者施用有效量的增加SIRT4蛋白质活性的试剂。

19.权利要求18的方法，其中所述受试者是营养不良的。

20.一种增加哺乳动物细胞中的过氧化物酶体增殖物激活受体-α（PPAR-a）活性的方法，其包括使所述哺乳动物细胞与减少SIRT4活性的化合物接触。

21.一种增加哺乳动物受试者的能量消耗的方法，其包括给所述受试者施用SIRT4抑制剂。

22.权利要求21的方法，其中所述受试者是过重的。