[发明专利]使用包括特异性配体的亲和树脂用于纯化人生长激素多肽的方法

权利要求书

1.一种用于纯化生长激素多肽的方法，所述方法包括以下步骤：

（a）在促进生长激素多肽的部分与亲和树脂结合的条件下，使含有所述生长激素多肽的悬浮液或溶液与所述亲和树脂接触；

（b）任选地用洗涤缓冲液洗涤含有生长激素多肽的所述亲和树脂；和

（c）用洗脱缓冲液洗脱含有生长激素多肽的所述亲和树脂，并且收集作为洗脱物的生长激素多肽；

其中所述亲和树脂是固相材料，所述固相材料具有与之共价固定的具有通式（I）的一种或多种配体，

其中

i = 1、2、...、m，并且j =1、2、...、n；

n和m是独立地在0-3范围中的整数，条件是n+m总和在1-4范围中；

p、q和r是独立地在0-6范围中的整数；

A11、…、A1m和A21、…、A2n独立地选自α-氨基酸部分、β-氨基酸部分、α-氨基磺酸部分和β-氨基磺酸部分；

Z1和Z2独立地选自氢、C_1-6烷基、羧酸部分（Z-C(=O)-）和磺酸部分（Z-S(=O)₂-），其中Z选自氢、任选取代的C_1-12-烷基、任选取代的C_3-12-环烷基、任选取代的C_1-12-烯基、任选取代的C_1-12-炔基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基和任选取代的杂环基；

R1和R2独立地选自氢和C_1-6-烷基；

X是直接或经由接头用于使所述配体与所述固相材料连接的基团，X选自羧酸（-COOH）、羧酸酯（-COOR）、羧酸酐（-COOCOR）、羧酸卤化物（-COHal）、磺酸（-S(=O)₂OH）、磺酰氯（-S(=O)₂Cl）、巯基（-SH）、二硫化物（-S-S-R）、羟基（-OH）、醛（C(=O)H）、环氧化物（-CH(O)CH₂）、氰化物（-CN）、卤素（-Hal）、伯胺（-NH₂）、仲胺（-NHR）、酰肼（-NH=NH₂）和叠氮化物（-N₃），其中R选自任选取代的C_1-12-烷基，并且Hal是卤素；和

所述配体（排除“X”和任何接头）的总分子量是200-2000 g/mol。

2.根据权利要求1的方法，其中Z1和Z2独立地选自氢、C_1-6 烷基、呫吨-9-羰基、2-氨基烟酰基、2-喹哪啶羰基、4,8-二羟基-2-喹啉羰基、4-喹啉羰基、5-甲基-2-硝基苯甲酰基、2-（巯基苯并咪唑）乙酰基、5-甲基-2-苯基-2H-1,2,3-三唑-4-羰基、6-羟基-2-萘甲酰基、4,7-二甲基吡唑并[5,1-c][1,2,4]三嗪-3-羰基、3-氨基-4-（苯磺酰）-2-噻吩羰基、（+/-）-3-氧代-1-茚满羰基、5,6,7,8-四氢吖啶-9-羰基、2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羰基、5-（4-甲基-2-硝基苯基）糠酰基、1-环己基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-羰基、喹喔啉-6-羰基和4-甲基-2-苯基嘧啶-5-羰基。

3.根据权利要求1的方法，其中Z1和Z2独立地选自氢、C_1-6 烷基、呫吨-9-基-羰基、5-甲基-2-苯基-2H-1,2,3-三唑-4-基-羰基、3-氨基-（苯磺酰）-噻吩-2-基-羰基、（+/-）-3-氧代-1-茚满基、5,6,7,8-四氢吖啶-9-基-羰基和2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基-羰基。

4.根据权利要求1的方法，其中Z1包括三环任选取代的杂芳族基团。

5.根据前述权利要求中任一项的方法，其中所述配体具有通式（II），

其中

Z1是Z-C(=O)-，其中Z选自任选取代的芳基、任选取代的杂芳基和任选取代的杂环基；

Z2选自氢和Z-C(=O)-，其中Z选自任选取代的C_1-12-烷基、任选取代的C_3-12-环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基和任选取代的杂环基；和

A2₁和A2₂各自独立地选自α-氨基酸和β-氨基酸。