[发明专利]操纵SNF1蛋白激酶活性用于改变含油生物中的油含量

权利要求书

1.转基因含油真核宿主细胞，所述宿主细胞包含：

(a)异源三聚SNF1蛋白激酶，所述激酶在与非转基因含油真核宿主细胞的异源三聚SNF1蛋白激酶的活性进行比较时具有降低的活性；以及

(b)在与非转基因含油真核宿主细胞的总脂质含量进行比较时提高的总脂质含量，所述非转基因含油真核宿主细胞包含活性不降低的异源三聚SNF1蛋白激酶。

2.权利要求1的转基因含油真核宿主细胞，其中所述异源三聚SNF1蛋白激酶的活性降低和总脂质含量的提高是由于选自下列的修饰：

(a)改变与所述异源三聚SNF1蛋白激酶相关联的上游调节蛋白；

(b)改变编码所述异源三聚SNF1蛋白激酶亚基的多核苷酸；以及

(c)改变由所述异源三聚SNF1蛋白激酶调节的下游蛋白。

3.权利要求2的转基因含油真核宿主细胞，其中所述异源三聚SNF1蛋白激酶的活性降低和总脂质含量的提高是由于选自下列的修饰：

(a)与所述异源三聚SNF1蛋白激酶相关联的上游调节蛋白的减量调节，所述上游调节蛋白是选自Sak1和Tos3的激酶；

(b)与所述异源三聚SNF1蛋白激酶相关联的上游调节蛋白的增量调节，所述上游调节蛋白是由己糖激酶同工酶2(Hxk2)组成的己糖激酶；

(c)与所述异源三聚SNF1蛋白激酶相关联的上游调节蛋白的增量调节，所述上游调节蛋白是葡糖激酶(Glk1)；

(d)与所述异源三聚SNF1蛋白激酶相关联的上游调节蛋白的增量调节，所述上游调节蛋白是Reg1-Glc7蛋白-磷酸酶1复合物的蛋白，其选自Reg1和Glc7；

(e)编码所述异源三聚SNF1蛋白激酶的SNF1α-亚基的多核苷酸的减量调节；

(f)编码所述异源三聚SNF1蛋白激酶的SNF1α-亚基的多核苷酸调节域的增量调节；

(g)无催化活性的Snf1α-亚基的增量调节；

(h)编码所述异源三聚SNF1蛋白激酶的SNF1β-亚基的多核苷酸的减量调节，所述β-亚基由Gal83组成；

(i)编码所述异源三聚SNF1蛋白激酶的SNF1γ-亚基的多核苷酸的减量调节；

(j)由所述异源三聚SNF1蛋白激酶调节的下游蛋白的增量调节，所述下游蛋白是选自Rme1和Mhy1的锌指蛋白；

(k)由所述异源三聚SNF1蛋白激酶调节的下游蛋白的增量调节，所述下游蛋白是微粒体细胞色素b₅还原酶(Cbr1)；

(l)由所述异源三聚SNF1蛋白激酶调节的下游蛋白的增量调节，所述下游蛋白是葡萄糖转运蛋白(Snf3)；

(m)由所述异源三聚SNF1蛋白激酶通过磷酸化调节的下游蛋白的突变的变体的增量调节，所述下游蛋白是选自乙酰-CoA羧化酶和二酰基甘油酰基转移酶的蛋白，并且其中所述突变的变体不能被所述异源三聚SNF1蛋白激酶磷酸化。

4.权利要求3的含油真核宿主细胞，其中编码所述SNF1蛋白激酶α-亚基的所述多核苷酸包含分离的Snf1核苷酸分子，所述核苷酸分子包含：

a)编码具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶活性的多肽的核苷酸序列，其中基于BLASTP比对方法在与选自下列的氨基酸序列进行比较时，所述多肽具有至少80％的氨基酸同一性：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：25、SEQ ID NO：27；

b)编码具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶活性的多肽的核苷酸序列，其中基于所述BLASTN比对方法在与选自下列的核苷酸序列进行比较时，所述核苷酸序列具有至少80％的序列同一性：SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：16、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：22、SEQ ID NO：24和SEQ ID NO：26；

c)编码具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶活性的多肽的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列在严格条件下与选自下列的核苷酸序列杂交：SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：16、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：22、SEQ ID NO：24和SEQ ID NO：26；或者，

d)(a)、(b)或(c)的所述核苷酸序列的互补序列，其中所述互补序列和所述核苷酸序列由相同数目的核苷酸组成并且100％互补。