[发明专利]用于治疗再灌注损伤的方法

说明书

相关申请的交叉引用

本发明要求提交于2008年8月1日的美国临时申请第61/085,766号的权益，其内容通过参考并入本文。

技术领域

本发明涉及使用鞭毛蛋白相关多肽治疗受再灌注影响的组织。

背景技术

缺乏血液和氧气的组织会经历缺血性坏死或梗死和可能不可逆的器官损害。一旦恢复对器官或组织的血液和氧气流(再灌注)，器官不会立即回到正常的缺血前状态。冠状动脉血流的再灌注对于使缺血或缺氧组织或器官复苏是必须的。即时的再灌注有助于拯救细胞和减少患病率和死亡率。缺血区域的再灌注可能导致反常的功能障碍，包括明显的内皮细胞功能障碍，这可能导致血管收缩、血小板和白细胞激活、氧化剂生成增加以及流体和蛋白外渗增加。

过去二十年间，几种设计来限制再灌注损伤的药理学干预已经得到见证。不幸的是，某些试剂的成功仅限于缺血和再灌注的实验模型。一致性临床益处的缺乏可能与多种因素有关，包括不良的临床试验设计、不当的药代动力学/药效学研究和人类体内模型的复杂性。

本领域中需要区分针对缺血相比再灌注的治疗策略，且可能需要试剂的组合来产生最大的临床益处。

发明内容

本文提供了一种治疗受再灌注影响的哺乳动物的组织的方法，所述方法可以包括对需要该治疗的哺乳动物施用包含鞭毛蛋白的组合物。所述组合物可以与可选自氮磷汀和维生素E的抗氧化剂共同施用。

再灌注可以由损伤所导致，所述损伤可以为缺血或缺氧。缺血可以选自心动过速、梗死、低血压、栓塞、血栓性栓塞(血凝块)、镰状细胞病、身体局部极端受压(localized pressure to extremities to the body)和肿瘤。缺氧可以选自血氧不足性缺氧(一氧化碳中毒；睡眠呼吸暂停、慢性阻塞性肺病、呼吸骤停；分流)、贫血性缺氧(O₂含量低)、血氧不足性缺氧和组织中毒性缺氧。所述局部受压可能因止血带所致。

所述组合物可以于氧气流入之前、同时或之后施用。所述组织可以选自胃肠道、肺、肾、肝、心血管系统、血管内皮、中枢神经系统、周围神经系统、肌肉、骨和毛发毛囊。

附图说明

图1展示了在静脉内施用浓度为0.01μg/只、0.5μg/只、1.0μg/只或5.0μg/只的鞭毛蛋白后的5天中的小鼠血清中的肌酸酐水平。

图2展示了在强加肾缺血和在对缺血性肾再灌注后测定存活率和肌酸酐之前施用于小鼠的鞭毛蛋白的影响。图A显示了用浓度为0.01μg/只、0.5μg/只、1.0μg/只或5.0μg/只的鞭毛蛋白或作为对照的PBS预处理的小鼠的存活百分比。图B显示相同的预处理小鼠和对照小鼠组中的肌酸酐水平。

图3展示了用浓度为0.01μg/只、0.5μg/只、1.0μg/只或5.0μg/只的PBS或鞭毛蛋白预处理的再灌注后24小时的缺血性肾细胞的组织病理学。Sham列指示分离自未强加肾缺血的小鼠的肾细胞。

图4展示了再灌注后7天的肾细胞的组织病理学。在第一图中，组织病理学载玻片显示出从在肾缺血前用PBS预处理并其后对缺血性肾进行再灌注的小鼠中分离的肾细胞。在第一图中，组织病理学载玻片显示出从在肾缺血前用PBS预处理并其后对缺血性肾进行再灌注的小鼠中分离的肾细胞。在第二图中，组织病理学载玻片显示出从用浓度为0.5μg/只的鞭毛蛋白预处理但未强加以肾缺血的小鼠中分离的肾细胞。第三图展示了如下的组织病理学载玻片：其显示了从用浓度为0.5μg/只的鞭毛蛋白预处理并强加以肾缺血且其后对缺血性肾进行再灌注的小鼠分离的肾细胞。

图5展示了向分离自用0.5μg/只的PBS或鞭毛蛋白预处理的小鼠的缺血肾细胞再灌注后的9小时和24小时的白细胞浸润。图5a是经免疫组织化学染色的肾组织细胞，其用于显示来自用0.5μg/只的PBS或鞭毛蛋白预处理的小鼠的经缺血和非缺血处理的肾细胞中再灌注后的9小时和24小时的嗜中性粒细胞的水平。图5b是浸润至分离自用0.5μg/只的PBS或鞭毛蛋白预处理的小鼠的肾组织细胞的嗜中性粒细胞、巨噬细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞的数目。图5c

图6展示了鞭毛蛋白在趋化因子CXCL1/KC和CXCL2/KC引导白细胞浸润缺血肾组织中的关键作用。图6b展示了在经鞭毛蛋白预处理的动物中再灌注后9小时在缺血性肾中急性期蛋白IL-Ib和IL-6(但不是TNFa)的mRNA水平也降低。

图7展示了经受45分钟的双侧肾蒂阻塞并在移除肾钳夹后的不同时间施用0.5μg鞭毛蛋白的C57BL/6小鼠组中的存活率和肌酸酐水平。