[发明专利]无细胞基质胶

说明书

本专利申请涉及与本申请同日提交、代理人案卷号为ETH5409USNP、标题为《制造无细胞基质胶的方法》的共同转让的专利申请。

技术领域

本发明总体而言涉及天然生物材料的领域，更具体而言涉及生物相容性胶如生物胶。

背景技术

一直公认胞外基质(ECM)是结缔组织的重要结构组分。ECM通常被描述为糖蛋白和蛋白聚糖的丝状结构，其连接到细胞表面，给细胞提供锚着、运动牵引力和位置识别。现有相当多的证据证明，细胞所精细产生的ECM会产生出这些细胞和其他细胞要响应的微环境，通过分化或维持它们的分化状态。ECM可作为基材，供粘附于其上的细胞进行组构。基于组织的ECM生物材料和装置已被广泛用于多种医学应用，如心脏瓣膜、猪小肠粘膜下层(SIS)、人真皮和牛心包膜。用已知的常规方法使同种异体的或异种的结缔组织如皮肤、腱、心包膜和SIS进行去细胞化(decellularized)(或者失活)，以提供一类称为无细胞基质的胞外基质，也可称为去细胞化基质。在去细胞化过程中，除去会导致组织排斥的细胞，而保留原始组织的关键生化成分和结构成分。

无细胞基质用于医疗器械中的某些应用是本领域公知的。一个例子是用于软组织连接、增强或构建的生物修复装置。该装置具有一片天然胞外基质和一片结合至该天然胞外基质部分的合成网状织物。可将这种植入物在真空压力下进行干燥，从而导致SIS的各个薄片之间和网状织物与相邻的SIS薄片之间的物理交联。

还已知将无细胞基质与增强型生物组织一起使用。将生物组分与非生物组分结合或组合在一起的方法包括组织包围非生物组分，非生物组分包围组织，或者组织包埋在非生物组分的针织物、机织物、编织物或其他织物当中，或者组织包覆这些织物。两种组分可共混在一起，或者各个组分可层叠并相互紧密卷绕。可通过附上类似于带箍(belt and hoop)式样的紧固带，给层叠的构造物施加压缩力。

常规的将合成构造物与无细胞基质组合在一起的方法的已知缺点和不足包括分层、操作性差和加工技术不方便。因此，需要新的将无细胞基质与合成支架组合在一起的方法。

发明内容

因此，公开了新的无细胞基质胶和新的制备无细胞基质胶的方法。还公开了新的增强型无细胞基质。

无细胞基质胶具有在水溶液中的无细胞基质。

本发明的另一个方面是制备本发明的无细胞基质胶的新方法。该方法包括如下的步骤。提供无细胞基质。将无细胞基质加到水溶液以提供混合物。将混合物在足够的温度范围中温育足够的时间，以有效形成无细胞基质胶。

本发明的又另一个方面是新的增强型无细胞基质。基质具有无细胞基质层、无细胞基质胶层增强层。其中，无细胞基质胶层是本发明的新型无细胞基质胶。

本发明的再一个方面是用本发明的新型无细胞基质进行疝气修复的方法。

通过以下具体实施方式和附图，本发明的这些方面和其他方面以及优点将变得更为显而易见。

附图说明

图1是显示用于制备本发明的无细胞基质胶和本发明的增强型无细胞基质的步骤的图。

图2是本发明的网状织物增强型无细胞真皮基质的SEM图像。

具体实施方式

本发明的无细胞基质胶是如下制备的：提供无细胞基质，将无细胞基质在水溶液中混合以形成无细胞基质混合物，然后将无细胞基质混合物在足够有效的温度下温育足够有效的时间以提供无细胞基质胶。

无细胞基质在本文中定义为已进行了去细胞化使得细胞核和细胞组分从胞外结构基质去除的组织。无细胞基质是从包括器官或器官的分离部分在内的组织制备。组织包括但不限于心脏瓣膜、小肠粘膜下层、真皮、羊膜、膀胱、网膜、心包膜、韧带、血管等。在一个实施例中，组织包括但不限于网膜和真皮。在另一个实施例中，组织是真皮。组织可获自各种哺乳动物来源，包括但不限于人、山羊、猪、牛、绵羊、马等。组织是通过常规技术进行去细胞化，包括诸如组织保存、去细胞化、洗涤、净化和储藏的步骤。

去细胞化步骤通常涉及通过用含有去污剂的盐溶液进行抽提和通过内切核酸酶进行消化来去除细胞组分。

然后将无细胞基质转移到水溶液中。在一个实施例中，先将无细胞基质加工成更小的片块再转移到水溶液中。无细胞基质可通过常规的方法加工成更小的片块，如用剪刀、刀片或小刀切割；磨成粉末，如球磨和低温磨；以及气流磨。将无细胞基质加工成更小的片块如加工成粉末，可提供更多的表面积，从而使得能够更快地溶解到水溶液中。在一个实施例中，先将无细胞基质通过冷冻研磨加工成粉末后再加到水溶液。