[发明专利]用于生产具有末端α-1,3-连接的半乳糖的蛋白质的酵母菌株

权利要求书

1.酵母或丝状真菌宿主细胞，其可以生产具有N-聚糖的重组糖蛋白，所述N-聚糖具有至少一个末端α-半乳糖基表位。

2.权利要求1的宿主细胞，其中对于糖蛋白上的聚糖，所述宿主细胞在起始α-1,6甘露糖基转移酶活性方面受损。

3.权利要求1的宿主细胞，其中所述宿主细胞的多萜醇-P-Man:Man5GIcNAc2-PP-多萜醇α-1,3甘露糖基转移酶活性减少或消除。

4.权利要求1的宿主细胞，其中所述宿主细胞表达选自α-1,2甘露糖苷酶I活性、甘露糖苷酶II活性、甘露糖苷酶IIx活性和III类甘露糖苷酶活性的甘露糖苷酶活性。

5.权利要求1的宿主细胞，其中所述宿主细胞表达N-乙酰葡糖胺转移酶I(GnT)活性、β-半乳糖基转移酶(β-GalT)活性和UDP-半乳糖-4差向异构酶活性。

6.权利要求1的宿主细胞，其中所述宿主细胞选自巴斯德毕赤氏酵母（Pichia pastoris）、Pichia finlandica、喜海藻糖毕赤氏酵母（Pichia trehalophila）、Pichia koclamae、膜醭毕赤氏酵母(Pichia mernbranaefaciens)、Pichia minuta(Ogataea minuts、Pichia lindneri)、Pichia opuntiae、耐热毕赤氏酵母(Pichiiz thermotolerans)、柳毕赤氏酵母（Pichia salictaria）、Pichia guercuum、皮杰普氏毕赤氏酵母（Pichia pijperi）、具柄毕赤氏酵母(Pichia stiptis)、甲醇毕赤氏酵母(Pichia methanolica)、毕赤氏酵母属物种(Pichia sp.)、啤酒糖酵母(Saccharomyces cerevisiae)、糖酵母属物种(Saccharomyces sp.)、多形汉逊氏酵母(Hansenula polymorpha)、克鲁维氏酵母属物种(Kluyveromyces sp.)、乳克鲁维氏酵母(Kluyveromyces lactis)、白色假丝酵母(Candida albicans)、构巢曲霉(Aspergillus nidulans)、黑曲霉(Aspergillus niger)、米曲霉(Aspergillus oryzae)、里氏木霉(Trichoderma reesei)、Chrysosporium luchnowense、镰孢属物种(Fusarium sp.)、禾谷镰孢(Fusarium gramineum)、Fusarium venenatum、小立碗藓(Physcomitrella patens)和粗糙链孢霉（Neurospora crassa）。

7.权利要求1的宿主，其中所述宿主表达融合蛋白，所述融合蛋白包括与靶向肽连接的α-半乳糖基转移酶的催化结构域，所述靶向肽将所述融合蛋白靶向到所述宿主细胞的ER或高尔基体。

8.权利要求1的宿主细胞，其中所述宿主细胞生产具有含末端α-半乳糖基表位的N-聚糖的糖蛋白，其中所述占优势的N-聚糖具有选自下述的结构：

(α-Gal)(β-Gal)GlcNAcMan5GlcNAc2；

(α-Gal)(β-Gal)2GlcNAc2Man3GlcNAc2；和

(α-Gal)2(β-Gal)2GlcNAc2Man3GlcNAc2。

9.权利要求1的宿主细胞，其中所述宿主细胞已工程化用于生产疫苗蛋白质。

10.权利要求9的宿主细胞，其中所述疫苗蛋白质选自抗病毒疫苗糖蛋白、抗细菌疫苗糖蛋白和抗癌疫苗糖蛋白。