[发明专利]总活菌数测定用培养基

说明书

技术领域

本发明涉及不含有来源于牛的成分的总活菌数测定用培养基，该培养基不显示细菌选择性，能够测定总活菌数。

背景技术

一直以来，在食品、化妆品、一般工业材料等领域中测定总活菌数时，广泛使用脑心浸液琼脂培养基、心浸液琼脂培养基、大豆酪蛋白消化琼脂培养基(CASO琼脂培养基)、标准琼脂培养基和营养琼脂培养基。

对于活菌数的测定，例如，在日本食品卫生法所规定的食品卫生检查指针中，根据作为测定对象的菌种不同，详细写明了检查方法。其菌种分类为总活菌、大肠菌群/大肠杆菌、沙门氏菌属细菌、金黄色葡萄球菌、肠炎弧菌/弯曲杆菌和真菌。

在总活菌数(标准平板菌数)测定中，通常使用混释法，用灭菌稀释水将试验样品依次稀释至10倍，将1ml或1g该稀释后的溶液添加到培养皿中作为样品液，在该样品液中注入灭菌溶解并保持45℃的标准琼脂培养基，在琼脂固化之后，在维持36℃的恒温槽中进行培养，计测生长的菌落(集落)数，作为1ml或1g样品中的活菌数。

此外，在化妆品中，总活菌数测定方法已经在第十四版日本药典-微生物限度试验法中进行了规定，其中明确记载了薄膜过滤法、琼脂平板法、琼脂平板表面涂布法和液体培养基连续稀释法这4种方法。琼脂平板法的试验方法与食品卫生检查指针中所记载的方法基本上相同。薄膜过滤法、琼脂平板法、琼脂平板表面涂布法中规定的培养基使用CASO琼脂培养基。

包括上述培养基在内的总活菌数测定用培养基的组成在表1中显示，它们都含有大量的来源于牛的成分。而且，含有来源于牛的成分的培养基包含高品质蛋白质，是无细菌选择性、细菌生长良好的培养基。

表1总活菌数测定用培养基组成

然而，由于目前存在牛海绵状脑病的问题，以牛肉为代表的来源于牛的部位的进口受到限制，或者在各国进行出口限制，因而含有来源于牛的成分的培养基中存在供应不稳定、不能获得的成分，目前处于难以获得期望状态的培养基的状况。此外由于这样的状况，因而现状是全世界不能通用相同成分的培养基。

发明内容

鉴于这样的状况，本发明的目的是提供不含有来源于牛的成分、无细菌选择性、细菌生长良好的总活菌数(标准平板菌数)测定用培养基。

本发明者们在不含有来源于牛的成分的前提下组合了各种成分而调制出培养基，并对各种细菌群的生长效果进行了评价，结果发现了无细菌选择性、生长良好的组成，从而完成了本发明。

即，第1发明是一种总活菌数测定用培养基，其特征在于，不含有来源于牛的成分，以大豆蛋白胨和酵母提取物为必须成分，并含有葡萄糖、赖氨酸和鱼肉提取物中的至少1种。

此外，第2发明是根据第1发明所述的总活菌数测定用培养基，其特征在于，在1,000ml纯化水中含有以下成分：

大豆蛋白胨        10g

酵母提取物        1g

葡萄糖            1～10g

赖氨酸            1～3g

鱼肉提取物        3～10g

琼脂              15～18g。

本发明的不含有来源于牛的成分的总活菌数测定用培养基是与一直以来使用的含有来源于牛的成分的脑心浸液琼脂培养基、心浸液琼脂培养基、CASO琼脂培养基、标准琼脂培养基和营养琼脂培养基相比，各菌种生长特性和检测灵敏度毫不逊色的培养基，其成分也不存在进出口的问题，可稳定地供应，在任何地方都能够获得，因此可以获得期望状态的培养基，是非常有用的。此外，本发明的总活菌数测定用培养基可以在全世界通用。

具体实施方式

本发明中的总活菌数测定用培养基不含有一直以来使用的来源于牛的成分，以大豆蛋白胨和酵母提取物为必须成分，并含有葡萄糖、赖氨酸和鱼肉提取物中的至少1种。而且，作为其成分，优选列举下述成分组成的培养基。

大豆蛋白胨        10g

酵母提取物        1g

葡萄糖            1～10g

赖氨酸            1～3g

鱼肉提取物        3～10g

琼脂              15～18g

纯化水            1,000ml