[发明专利]胰岛淀粉样多肽和鲑鱼降钙素的衍生杂合肽

说明书

发明领域

本发明涉及杂合肽衍生物，其中所述杂合肽包含人胰岛淀粉样多肽序列的C-末端、鲑鱼降钙素肽序列的中间部分和人胰岛淀粉样多肽(amylin)肽序列的N-末端，并且其中白蛋白结合部分与所述杂合肽连接，任选通过接头连接。

发明背景

大量人群罹患糖尿病和肥胖症并且数量还在不断增加。糖尿病是一种利用葡萄糖的能力部分或完全丧失的代谢疾病。用于降低血糖的最有效抗糖尿病药就是胰岛素及其类似物。长期以来，已经知道，当传统胰岛素用于治疗糖尿病时，它与体重增加有关。人胰岛淀粉样多肽是一种长度为37个氨基酸的肽，其理化性质使其用作药物时很棘手。具体地讲，它具有在体外和/或离体形成原纤维的趋势并因沉淀而变得无效。一种称为Symlin的药品目前已上市，它含有人胰岛淀粉样多肽的类似物(普兰林肽(pramlintide))，其中37个氨基酸中有3个被脯氨酸取代。这基本上改善了形成原纤维的趋势。已知普兰林肽能减少人的食物摄取。然而，即使是普兰林肽也难以在中性pH溶液中保存，因而在一种酸性溶液中提供，即Symlin^TM。

在哺乳动物中，降钙素在骨髓更新和钙代谢的调节中起作用。由升高的血清钙水平导致从甲状腺中释放的降钙素对骨和其它器官起作用，从而使血清钙水平趋向减低。

降钙素已经用于在临床上治疗钙代谢障碍和疼痛，并且它在哺乳动物中增加葡萄糖水平的关系已经成为不同报告的主题。降钙素在治疗糖尿病中的用途描述于美国专利号5,321,008(1994年6月14日授权)和美国专利号5,508,260(1996年4月16日授权)。

国际专利申请WO 2006083254公开了胰岛淀粉样多肽家族肽，其包含胰岛淀粉样多肽和其类似物的环状区；降钙素或其类似物的α螺旋区的至少部分α螺旋区和降钙素或其类似物的α螺旋区。

发明概述

本发明涉及杂合肽衍生物，其中所述杂合肽包含人胰岛淀粉样多肽序列的C-末端、鲑鱼降钙素肽序列的中间部分和人胰岛淀粉样多肽序列的N-末端，并且其中白蛋白结合部分与所述杂合肽连接，任选通过接头连接。

一方面，本发明的衍生物是类似杂合肽衍生物，其中与所述母体杂合肽相比，所述类似杂合肽具有1-12个氨基酸取代。

另一方面，本发明衍生物的白蛋白结合部分与所述杂合肽的N-端氨基酸和/或C-端氨基酸和/或与所述杂合肽内部的一个或多个氨基酸连接。

本发明的衍生物可包含连接在所述杂合肽N-端的由1-12个额外氨基酸组成的N-端延伸，其中所述白蛋白结合部分与所述额外氨基酸的N-端氨基酸连接，任选通过接头连接。

本发明还包括这样的衍生物：其中与所述母体杂合肽相比，已添加0-8个额外电荷。

也描述了包含本发明衍生物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物和用作药物的本发明衍生物。

定义

术语“效力”用于描述指定化合物在测定中的效应，在所述测定中已经建立了对数浓度和化合物效应之间的S形曲线关系。此外，反应应当可在0-100％之间变化。EC50(有效浓度50)可用于描述指定化合物在测定中达到50％反应的浓度。效力可在测定部分所述的例如萤光素酶测定中进行检测。

术语“活性”一方面是指减少食欲和/或增加饱腹感的能力。可以按照例如描述于测定标题下的药理学测定I，通过测定减少食欲的能力而测定活性。

本文所用的术语“人胰岛淀粉样多肽”是指与来自人胰脏β-细胞的胰岛素共分泌的人胰岛淀粉样多肽，其具有以下SEQ ID No：1所示序列：

Lys-Cys-Asn-Thr-Ala-Thr-Cys-Ala-Thr-Gln-Arg-Leu-Ala-Asn-Phe-Leu-Val-His-Ser-Ser-Asn-Asn-Phe-Gly-Ala-Ile-Leu-Ser-Ser-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Asn-Thr-Tyr-NH₂

SEQ ID No：1

其中二硫桥位于位置2和位置7的半胱氨酸之间并且其C-末端呈酰胺基形式。

“普兰林肽”在本文中是指人胰岛淀粉样多肽的类似物，其中人胰岛淀粉样多肽在位置25、28和29已被3个脯氨酸残基取代，得到25Pro，28Pro，29Pro人胰岛淀粉样多肽。因此，普兰林肽具有以下序列：