[发明专利]建立针对生物来源之起始材料中多种分析物的标准品的方法

说明书

发明背景

本申请要求2008年4月23日提交的美国临时专利申请(序列号No.61/047,232)的优先权，其全部内容通过引用并入本文中。

A.技术领域

本发明一般地涉及分子生物学领域。更特别地，其涉及建立可用于多元测定之标准品的方法。在一些具体实施方案中，本发明涉及从多种起始材料建立基本上均一之标准品的方法。

B.相关技术描述

近来出现的多元测定在制备用于这些测定的标准品时引发了特有的问题。

在分析一种分析物的单一测定中(即，在单测定中)，含有已知浓度之分析物的一系列标准品被用于建立“标准曲线”，据此测量未知样品。一般使用两种方法来建立标准品：a)找到或建立不含靶标分析物的基质，将纯化的分析物(标准品)掺入其中，或b)具有已知高水平分析物的样品被用作“高，，标准品，通过用基质稀释该高标准品来建立较低的水平(其中不含或含有低水平的靶标分析物)。

在多元测定中，当易于获得允许进行“掺入”的纯分析物时，常使用上面所列的方法a)。当可以获得每种纯靶标分析物并且可以对其进行掺入操作时，该方法是完全适用的。对于多元模式中的每个分析物，简单重复这一方法，从而，如果需要分析物x、y和z的话，则将每一种掺入到同一基质中以确保单一标准品具有测定所需的、合适水平的所有分析物。

当分析物只能通过生物学方式获得和/或不容易进行纯化或其它操作时，便出现了特别复杂的问题。在这种情况下，人们通常设法鉴定具有不同水平之目的分析物的大量不同样品，然后混合所述材料以使所有分析物均达到给定的目标值。这意味着，如果选取针对一种分析物的高标准品，则构成多元测定之其它分析物可能具有或不具有合理的水平，导致标准品不能容易地进行重复和/或不具有期望的目标值。因此，需要一种用于多元测定的、稳定地建立基本均一之标准品的方法。

发明概述

在一些方面中，本发明提供了从起始样品建立针对多种分析物之多元标准品的方法，其包括获取包含多种目的分析物的样品；测定每种目的分析物的浓度；建立一种或多种特定缺乏样品(specifically deficient sample)；确定建立多元标准品(其中每种分析物的浓度基本均一)所需的起始样品和每种特定缺乏样品的量(如果有的话)；以及混合所述量的所述起始样品和特定缺乏样品来建立多元标准品。

所述起始样品可以是含有目的分析物的任何组合物。起始样品可以包含浓度基本均一或高度不同的多种目的分析物。在本发明的一些方面中，样品可以是体液(包括但不限于全血、血清、唾液、尿液、精液)。在一些具体实施方案中，起始样品是血液样品。分析物可以是待测量的任何物质。在一些具体实施方案中，分析物是蛋白质、抗体或蛋白酶。

在一些实施方案中，建立一种或多种特定缺乏样品可包括处理起始样品之一部分或特定缺乏样品以去除至少第一目的分析物。可以去除目的分析物从而建立不含该特定分析物或至少含有低浓度之该特定分析物的生物样品。通常，进行该操作时，尽可能减少对其它分析物之水平的影响，但是，该方法并不需要100％的特异性。在一些实施方案中，另一分析物的非特异性减少低于5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％或40％。目的分析物不必完全去除。当至少约50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的分析物被去除时，则分析物被“基本上去除”。可以用基本上去除靶标分析物的任何方式来处理样品。在一些具体实施方案中，所述处理包括中和分析物、物理去除分析物、破坏分析物或隔离分析物。