[发明专利]具有阿魏酸酯酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸

权利要求书

1.一种具有阿魏酸酯酶活性的分离的多肽，选自下组：

(a)多肽，其包含与SEQ ID NO：2的成熟多肽具有至少60％同一性的氨基酸序列；

(b)由如下多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸在至少中等严紧条件下与以下杂交：(i)SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列，(ii)包含SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列的基因组DNA序列，或(iii)(i)或(ii)的全长互补链；

(c)由如下多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸包含与SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列具有至少60％同一性的核苷酸序列；和

(d)包含取代、缺失和/或插入一个或多个(几个)氨基酸的SEQ ID NO：2的成熟多肽的变体。

2.权利要求1的多肽，其由如下多核苷酸编码，所述多核苷酸在至少中等严紧条件下与以下杂交：(i)SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列；(ii)包含SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列的基因组DNA序列；或(iii)(i)或(ii)的全长互补链。

3.权利要求1或2的多肽，其由如下多核苷酸编码，所述多核苷酸包含SEQ ID NO：1的核苷酸序列或其编码具有阿魏酸酯酶活性的片段的亚序列，或由SEQ ID NO：1的核苷酸序列或其编码具有阿魏酸酯酶活性的片段的亚序列组成。

4.权利要求1到3任一项所述的多肽，其由如下多核苷酸编码：所述多核苷酸包含SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列，或由SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列组成。

5.权利要求1到4任一项所述的多肽，其中所述多肽是变体，所述变体包含取代、缺失和/或插入一个或多个(几个)氨基酸的SEQ ID NO：2的成熟多肽。

6.权利要求1到5任一项所述的多肽，其中所述成熟多肽是SEQ ID NO：2的氨基酸1到249。

7.权利要求1到6任一项所述的多肽，其中所述成熟多肽编码序列是SEQ ID NO：1的核苷酸152到901。

8.一种分离的多核苷酸，包含编码权利要求1到7任一项所述的多肽的核苷酸序列。

9.权利要求8的分离的多核苷酸，在SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列中包含至少一个突变，其中所述突变体核苷酸序列编码SEQ ID NO：2的成熟多肽。

10.一种核酸构建体，包含权利要求8或9的多核苷酸，所述多核苷酸可操作地连接于一个或多个调控序列，所述调控序列在表达宿主中指导多肽的产生。

11.一种重组表达载体，包含权利要求10的核酸构建体。

12.一种重组宿主细胞，包含权利要求10的核酸构建体。

13.权利要求12的重组宿主细胞，所述宿主细胞为真菌或细菌宿主细胞。

14.一种产生权利要求1到7任一项所述的多肽的方法，包括：(a)在有益于所述多肽产生的条件下培养细胞，所述细胞以其野生型的形式产生所述多肽；和(b)回收所述多肽。

15.一种产生权利要求1到7任一项所述的多肽的方法，包括：(a)在有益于所述多肽产生的条件下培养宿主细胞，其包括核酸构建体，所述核酸构建体包含编码所述多肽的核苷酸序列；和(b)回收所述多肽。

16.一种产生包含突变体核苷酸序列的多核苷酸的方法，所述突变体核苷酸序列编码具有阿魏酸酯酶活性的多肽，所述方法包括：(a)在SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列中引入至少一个突变，其中所述突变体核苷酸序列编码多肽，所述多肽包含SEQ ID NO：2的成熟多肽或由SEQ ID NO：2的成熟多肽组成；和(b)回收所述包含突变体核苷酸序列的多核苷酸。

17.通过权利要求16的方法产生的突变体多核苷酸。

18.一种产生多肽的方法，包括：(a)在有益于产生所述多肽的条件下培养细胞，所述细胞包含权利要求16的突变体多核苷酸，所述多核苷酸编码所述多肽；和(b)回收所述多肽。