[发明专利]普伐他汀萃取

说明书

发明领域

本发明涉及HMG-CoA还原酶抑制剂普伐他汀的萃取和对伴随的杂质去除。

发明背景

普伐他汀是酶(3S)-羟基-3-甲基戊二酰-辅酶A(HMG-CoA)还原酶的抑制剂。普伐他汀的钠盐——普伐他汀钠(1)是有效的降胆固醇药剂，其可以商业获得用于治疗高脂血症。可以通过对发酵获得的前体康帕汀(compactin)进行微生物氧化，来制备普伐他汀，所述康帕汀的钠盐具有结构(2)，例如描述于US 4,346,227中的。最近，一种经改进的途径描述于WO 2007/147827中，其中在宿主细胞中直接制备普伐他汀，所述宿主细胞装备有用于康帕汀生物合成的基因和用于将康帕汀转化成普伐他汀的基因。

尽管在普伐他汀生产工艺中迄今为止取得了一些进展，但是仍然存在需要被解决的一些缺点。现有技术方法的这些缺点之一是，痕量康帕汀(2)仍然作为游离酸、作为离子化盐或内酯形式存在于终产物中。由于该杂质在结构上与普伐他汀密切相关，所以从普伐他汀样品中去除康帕汀是繁冗的(tedious)。

因为活性药物中间体的纯度对于安全有效的药物的生产而言是重要的，所以现有技术中常常专注于普伐他汀的纯化。

WO 92/16276中描述了一种方法，所述方法使用高效液相色谱(HPLC)。尽管提到了纯度大于99.5％的普伐他汀，但是没有提到所述方法如何涉及作为杂质的康帕汀。另外，HPLC具有若干缺点，即需要再循环树脂、使用过量的溶剂并且在工业规模上的适用性差。实际上，WO 92/16276中没有公开普伐他汀的大规模纯化。

WO 99/42601中公开了一种分离/纯化方法，其中将水性普伐他汀溶液酸化，随后用乙酸乙酯萃取，之后进行若干结晶步骤。尽管所述流程公开了相对大的规模(从30升的发酵液开始)，但是没有指出所述方法用于纯化含有康帕汀的普伐他汀的适应性。

WO 00/17182中描述了一种基于置换色谱的纯化方法。其中描述了通过置换色谱进行实验室规模(即1克和更少)的普伐他汀样品纯化。尽管提到了99.7％和99.8％的普伐他汀钠纯度，但是这些纯度指的是溶液中的普伐他汀。没有公开经分离的普伐他汀钠，也没有指出所述方法对于去除康帕汀的作用。

专利申请US 2003/0216596描述了用无机酸(如HBr、HCl、H₂SO₄、HClO₄、H₃PO₄和HNO₃)或碱(如碱金属碳酸盐、碳酸氢盐、氰化物、氢氧化物和醇盐)分解杂质。其公开了具有多达99.67％纯度的，以半大规模(即最多32g样品)纯化的经分离的普伐他汀钠，所述申请关注的是去除6-表-普伐他汀，其没有提到康帕汀，也没有给出所述方法是否适用于减少康帕汀的存在的暗示。

EP 877089、US 2003/199047、US 2004/138294、WO 00/46175和WO 01/39768中也公开了其它分离/纯化方法，尽管这些方法均未提到终产物普伐他汀中康帕汀量的有效减少。

因此仍需要更进一步改进的普伐他汀纯化方法，更特定地，在涉及杂质康帕汀的存在的方面。

发明详述

本发明的第一方面提供了用于纯化普伐他汀或其药学可接受的盐的方法。已经发现，在范围从5.0到7.0的pH值下，用水或水性溶液萃取含有处于不与水混溶的溶剂中的普伐他汀和康帕汀的溶液，得到其中普伐他汀∶康帕汀比例增加的水性溶液。在范围从5.0到7.0的pH值下将普伐他汀从有机相萃取进水相是没有先例的，因为现有技术鼓励在高于pH 7.0时进行这类萃取，此时分配系数是良好的，用其它有机酸进行的萃取也如是。另外，基于普伐他汀和康帕汀分子结构之间的高度相似性，分配系数的显著差异是无法提前预计到的。然而，我们发现：使用本发明的方法时，普伐他汀∶康帕汀的比例可以从起始混合物中的3∶1被提高至萃取后的高达100∶1。