[发明专利]抗-FLT3抗体

说明书

本申请要求均于2008年5月30日提交的美国临时申请号61/130,395、61/130,539和61/103,394的优先权。

本发明涉及对人Fms样酪氨酸激酶3受体(FLT3)特异的人抗体，包括其片段或部分。抗体被用于治疗癌细胞的生长并且可以单独或与抗肿瘤剂(包括但不限于甲氨蝶呤(MXT))组合用于治疗白血病。

人Fms样酪氨酸激酶3受体(FLT3)，也称作胎肝激酶2(FLK-2)、干细胞酪氨酸激酶1(STK-1)和CD135(SEQ ID NO：43)，是III类受体酪氨酸激酶的成员。通常，FLT3在未成熟的骨髓-淋巴细胞前体细胞和树突细胞前体上表达，但是很少在成熟的成人细胞上表达。FLT3在约90％的急性粒细胞白血病(AML)、多数急性淋巴细胞白血病(ALL)和慢性粒细胞白血病的原始细胞危象期(BC-CML)中过表达。FLT3配体(FL)的刺激增强了白血病细胞的增殖和存活。FLT3信号转导的抑制导致树突细胞中的细胞凋亡和免疫应答的抑制。

小分子抑制剂不是完全FLT3特异的并且可以产生药物抗性。从而，小分子FLT3抑制剂还没有提供白血病的有效靶向疗法。非常希望有该未满足的医学需求的新的治疗。抗体方法可以克服与小分子FLT3抑制剂相关的一些缺点。首先，抗体对于确定的抗原是特异的，从而避免了抑制多种激酶引起的潜在副作用。其次，FLT3中和抗体靶定细胞外结构域，其比激酶结构域较不易于突变，降低了药物抗性的可能性。第三，抗体可以募集免疫效应机理，如抗体依赖性细胞毒性(ADCC)和/或补体介导的细胞毒性(CMC)，以杀死目标肿瘤细胞，导致增加的治疗功效。最后，FLT3特异性抗体可以对于野生型(特别在中和性抗体的情况下)和突变的FLT3(由于免疫效应机理)都是有活性的，扩展了目标患者群体。

过去在开发白血病治疗剂包括FLT3抑制剂的努力(Li Y.，等人，Int.J.Hematol.82(2)：108-14(2005)，Li Y.，Drug Development Research 67(6)：495-500(2006).Li Y.，等人，Expert Opinion in Biological Therapy 7(3)：319-330(2007.))在很大程度上是不成功的。已经包括了其他开发策略：US5,777,084杂交瘤抗体；WO95/27062拮抗剂抗体，WO94/28391抗配体的抗体；WO2005/094823小分子。

Zheng R.，等人，Blood 103(1)：267-274(2004)，Li Y.，等人，Blood104(4)：1137-44(2004)，Piloto，O.，等人，Cancer Res.65(4)：1514-22(2005)，Williams B.，等人，Leukemia 19(8)：1432-8(2005)，Piloto O.，等人，CancerRes.66(9)：4843-51(2006)Piloto O.，等人，Blood 109(4)：1643-1652(2007)和Brent R.，等人，AACR Annual Meeting 2007，Los Angeles(2007)公开了对FLT3受体具有高结合亲和力的人拮抗剂抗体。

一些抗FLT3抗体，包括EB10、NC7和D4-3，抑制FLT3的配体依赖性(野生型受体)以及配体独立的(突变受体)活化(见Piloto，Cancer Res.，上文)。在本发明之前，本发明的抗FLT3抗体的确切CDR序列和表位结合结构域还是未知的。

此外，需要提供备选的抗FLT3抑制剂，其与本领域已知的那些抑制剂相比，对FLT3具有高结合亲和力并且阻断该配体与FLT3受体的结合，因此抑制FLT3的活化和其信号途径。本发明试图提供备选的抗FLT3抗体，其与本领域已知的那些抑制剂相比对FLT3具有提高的配体阻断和结合亲和力。

还需要提供备选的抗FLT3抑制剂，其诱导细胞表面FLT3的快速和有效的内化和下调。本发明试图提供人抗FLT3抗体，其与本领域已知的那些抑制剂相比提供了细胞表面FLT3的快速和有效的内化和下调。

还需要提供备选的抗FLT3抑制剂，其抑制白血病中野生型FLT3和MPK、PI3K和STAT5途径的下游激酶的FL诱导的磷酸化。本发明试图提供人抗FLT3抗体，其与本领域已知的那些抑制剂相比抑制白血病中野生型FLT3和MPK、PI3K和STAT5途径的下游激酶的FL诱导的磷酸化。