[发明专利]胆碱酯酶抑制性物质检测器件、检测试剂盒及检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及胆碱酯酶抑制性物质检测器件、检测试剂盒及检测方法。

背景技术

一直以来，已知残留在农作物或饮用水等中的农药成分对人体有不良影响。

因此，尤其是含有胆碱酯酶抑制性物质的有机磷类农药或胺基甲酸盐(或酯)(cabamate)类农药因为会引发神经病变(neuropathy)而造成严重问题。

由于这些状况，为了供给安心安全的食物、饮用水等，期望能开发出残留农药的检测技术，到目前为止，已提出各种各样的农药检测器件及检测方法。

以往所进行的大部分农药检测方法，是使用如气相色谱(GC)、气相色谱-质谱(GC/MS)、液相色谱(LC)、液相色谱-质谱(LC/MS)的分析仪器。

这些分析方法具有可以高感度定性、定量的优点，但由于需要大型器件，同时因手法繁琐而使检测费时，而有无法进行多样品分析或无法当场检测的缺点。

如此，由于仪器分析会有费工夫及费时的情形，因此，对于有机磷类农药或胺基甲酸盐(或酯)(cabamate)类农药的检测，例如，专利文献1提出一种农业检测方法，是利用农药中含有的胆碱酯酶抑制性物质使胆碱酯酶失活而降低水解活性作用，从而测量因水解所致的底物分解量，从而进行检测。

然而，在专利文献1的方法中，由于水解产物的发色反应微弱，因此无法简单地以目视判定通过吸光度测定来测定的底物分解量，因而有无法快速检测的问题。

同时，利用与专利文献1方法相同的原理，可以简单地以目视判定试料中是否存在有机磷类农药及胺基甲酸盐(酯)类农药的检测试剂盒，例如已有NEOGEN公司AT-10/AT-25(AgriScreen ticket 10/25)等贩售。

专利文献1：日本特开平09-107992号

发明内容

(发明待解决的课题)

然而，如上述检测试剂盒，不一定具有足够的检测限，检测限为例如：加保利(Carbaryl)为7.0ppm、陶斯松(chlorpyrifos)为0.7ppm、甲基陶斯松(Chlorpyrifos-methyl)为1.0ppm、大利松(diazinon)为2.0ppm。

此外，日本国内自2006年5月29日起修正部分食品卫生法，在有胆碱酯酶抑制性物质的有机磷类、胺基甲酸盐(酯)类农药的残留农药分析中，由于已改变食品中残留农药浓度的基准值，对于新的基准值，这些检测试剂盒几乎不具有足够的敏感度，因此仍期望在维持简便性的同时也能更提高检测限。

本发明是有鉴于如上述事实而作的发明，其课题是提供以低成本即可通过目视进行判定的胆碱酯酶抑制性物质的高感度检测器件、检测试剂盒及检测方法。

(解决课题的手段)

本发明为了解决上述课题而提供以下器件：

第1是胆碱酯酶抑制性物质检测器件，其特征是，在容器内底部的基底层上，固定有含有胆碱酯酶的反应层。进一步，第2是在前述检测器件的反应层中形成空隙，第3是前述第1或第2的检测器件，其中，基底层及反应层是由亲水性光硬化性树脂构成的。

又，第4是一种胆碱酯酶抑制性物质检测试剂盒，所述试剂盒含有前述第1至第3任意一项的检测器件、注射筒、可安装在注射筒前端部且内部充填有管柱粒子的管尖(column tip)、以及通过与胆碱酯酶反应而产生发色的底物。第5是第4的胆碱酯酶抑制性物质检测试剂盒，其中，通过与胆碱酯酶反应而产生发色的底物是乙酸吲哚酯。

进一步，第6是一种胆碱酯酶抑制性物质检测方法，所述方法是判定试料中是否存在胆碱酯酶抑制性物质的方法，所述方法为1)在前述1至3任意一项的检测器件内添加试料，2)添加通过与胆碱酯酶反应而产生发色的底物，3)如不产生发色，则判定在试料中存在胆碱酯酶抑制性物质；第7是前述第6的检测方法，经由管柱捕集试料并进行氧化处理后，将所述试料添加至前述之1至3任意一项的检测器件内；第8是一种有机磷类农药的检测方法，所述方法是判定试料中是否存在有机磷类农药之方法，所述方法为1)经由管柱捕集试料，并进行氧化处理，2)将此试料加入前述1至3任意一项的检测器件内，3)添加通过与胆碱酯酶反应而产生发色的底物，4)如不产生发色，则判定在试料中存在胆碱酯酶抑制性物质；第9是前述第6至第8任意一项的检测方法，其中，通过与胆碱酯酶反应而产生发色的底物是乙酸吲哚酯。

(发明效果)

如根据本发明的胆碱酯酶抑制性物质检测器件，由于基底层的存在，在反应层使用的液量可以是少量，由于可以抑制胆碱酯酶的使用量，因此可以削减成本。