[发明专利]肿瘤细胞恶性程度的评价方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种肿瘤细胞恶性程度的评价方法。具体而言，本发明涉及的方法是从含有肿瘤细胞的试样制备含受体酪氨酸激酶(receptor typetyrosine kinase，以下称“RTK”)的细胞膜级分，在有RTK活性抑制剂和无RTK活性抑制剂的条件下测定该细胞膜级分中的RTK酶活性，通过比较所得结果评价肿瘤细胞恶性程度的方法。

背景技术：

细胞的细胞膜中存在被称为RTK的激酶。已知这种激酶在细胞分化和增殖中发挥着重要作用。作为RTK，已知有胰岛素样生长因子受体(IGFR)、血小板衍生的生长因子受体(PDGFR)、人类表皮细胞生长因子受体(HER)、血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)等。

根据迄今为止的研究，已发现某个特定的RTK会在某个特定的肿瘤细胞中过度表达。比如已知HER中的一种——HER2在乳腺癌中基因和蛋白质的表达量增加。因此，一般认为，通过调查乳腺癌患者的HER2的存在量可预测乳腺癌的复发可能性。据报告，作为HER2抑制剂的抗体药物赫赛汀(注册商标；通用名：曲妥珠单抗)对乳腺癌有治疗效果。

同样，对其他RTK的基因和/或蛋白质的表达量与肿瘤细胞增殖和转移的关系也在进行研究。对RTK靶向的抑制药剂抑制肿瘤细胞增殖的效果和抑制肿瘤细胞转移的效果也在进行研究。

比如，Sirotnak等(临床癌症研究(Clinical Cancer Research)，vol.6，p.4885-4892，2000；非专利文献1)用RT-PCR法测定HER之一的HER1(也称“EGFR”)的基因在肺癌和前列腺癌肿瘤细胞中的表达量(参照上述文献的图1)。并对HER1抑制剂易瑞沙(Iressa)(注册商标；通用名：吉非替尼)对肿瘤细胞增殖的影响进行了研究(参考上述文献的图3)。Sirotnak等人根据这些结果报告，HER1表达量最高的肿瘤细胞株(A-431)的增殖因易瑞沙得到了最大程度的抑制。此结果显示，越是HER1表达量多的肿瘤细胞，易瑞沙抑制增殖的效果越高。

对此，Ciardiello等(临床癌症研究(Clinical Cancer Research)，vol.7，p.1459-1465，2001；非专利文献2)表示，HER1的表达量与易瑞沙IC50(药物抑制50％细胞增殖的浓度(μM))未必一定相关。具体而言，HER1的表达量在MCF-7ADR、OVCAR-3和SW480株中很高，在ZR-75-1和KATOIII株中很低(参考上述文献的表1)。另一方面，易瑞沙IC50的值在ZR-75-1和KATOIII株中和在MCF-7ADR、OVCAR-3和SW480株中一样低(参考上述文献的表2)。因此可以知道，与HER1的表达量无关，这些细胞株被易瑞沙在同样程度上抑制了增殖。

这些研究结果表明，像HER1这种RTK基因和/或蛋白质的表达量与RTK抑制剂对肿瘤细胞增殖的抑制效果之间未必一定有相关关系。

非专利文献1：Francis M.Sirotnak等“抑制人类肿瘤异种移植的细胞毒性药物，在通过一种叫做ZD1839(易瑞沙)的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂的合成后，其功效明显增强”(“Efficacy of Cytotoxic Agentsagainst Human Tumor XenograftsIs Markedly Enhanced By Coadministration of ZD1839(Iressa)，a Inhibitor of EGFR Tyrosine Kinase”)，临床癌症研究(Clinical Cancer Research)，vol.6，p.4885-4892，2000

非专利文献2：Ciardiello等“通过ZD1839(易瑞沙)，一种选择性表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂，来抑制增长因子的生成和人体内癌细胞的血管生成”(“Inhibition of Growth Factor Production andAngiogenesis in Human Cancer Cells by ZD1839(Iressa)，a SelectiveEpidermal Growth Factor Receptor Tyrosine Kinase Inhibitor”)，临床癌症研究(Clinical Cancer Research)，vol.7，p.1459-1465，2001

发明内容：

发明要解决的课题：