[发明专利]从雀梅树枝干中分离类黄酮的方法

说明书

[技术领域]

本发明为分离具有消除活性氧和预防动脉硬化效能的类黄酮的组分与新的类黄酮物质。进一步详细说明为有关于从雀梅树枝干中简便、快速分离能用于食品添加剂、健康机能性食品、循环系统疾病防治材料以及其他医药品主·副原料的大量含有类黄酮的组分，并在其组分中简便，快速分离新的类黄酮物质的方法。

[技术背景]

雀梅树(Sageretia theezans)是一种主要生长在韩国南海岸、济州岛地区的常绿灌木，在日本、美国等地区主要用于盆栽。雀梅树树叶小、有尖刺，另称越桔。据民间传说喝雀梅树叶茶对治疗感冒有效，但事实上对其研究很少。在抗氧化物质中属于类黄酮化合物的成分大多数分布在植物的叶、枝条以及花粉，根据其结构特征分为黄酮(flavone)、黄酮醇(flavonol)、黄烷醇(flavanol)、黄烷酮醇(flavanonols)以及异黄酮(isoflavone)。为多数以糖苷形式存在的天然色素成分。类黄酮物质具有消炎、抗过敏、抗癌以及抗氧化特性(Havesteen B.，Biochem.Pharmacol.，32：1141-1148，1983；Fukuzawa和Takaishi，J.Act.Oxy.Free Rad.，1：55-69，1990)。这些功能特性主要源于消除诱发疾病和老化的活性氧即抗氧化作用，近年来也有关于这些物质影响细胞信息传导的报道。

此外，临床上也有报道摄取大量含有多酚类成分，特别是类黄酮的多种果菜类和茶、葡萄酒，可减少代谢性疾病和心血管疾病的发病率(Yoshida M.等，FEBS Letter 260：10-13，1990；Hertog等，J.Agric Food Chem.，40：2379-2383，1992a；Verma A.K.等，Cancer Res.，48：5754-5758，1998)。属于代谢性疾病的动脉硬化因血液中运输胆固醇的低密度脂蛋白的氧化而诱发，类黄酮物质对低密度脂蛋白(Low densitylipoprotein，LDL)的氧化有良好的效果。

因此，这些类黄酮物质以抗高血压剂、出血性疾病预防剂而被利用，或者根据其吸收紫外线作用、自由基的消除作用而用作食品、化妆品等机能性添加剂，因此人们一直致力于改进工艺和提高收率，降低生产成本。

在长期大量研究后，本专利申请人等报道雀梅树叶的乙酸乙酯溶解层组分中具有抗氧化功能的类黄酮物质(Chung SK等，J.Agric.Food Chem.，52：4664-4668，2004).根据韩国公开公布专利第2000-0026393提案有『可提高血清中HDL的生物類黄酮(Bioflavonoids)化合物，包括在以下一般项(I)。本发明的组合物可在人体及动物体内增加血清HDL，有利于防治心脏循环系统疾病。因此，可添加于药学组成物质及食品组成物中使用』的技术。

但是，在上述专利披露了利用水和乙醇碱性溶液处理含有类黄酮的柑橘、荞麦获取含有类黄酮的提取方法，但没有披露分离具有表征化学结构的类黄酮的技术。韩国第2000-0026393号专利文件记载有『将人参叶浸渍于50-80％甲醇中、提取、过滤、浓缩、在浓缩液中加入乙醚，分成为乙醚层和水层，将水层依次通过聚丙烯酰胺柱(polyacrylamide)和葡聚糖凝胶LH-20柱(sephadex column)，提纯三叶甙(trifolin)』的技术。

但是，上述方法的局限性在于山柰酚(Kaempferol)和其糖苷成分的提取，而没有任何关于同时提取和分离结构多样化的类黄酮物质的方法的教导或启示。加入乙醚溶液，使糖和蛋白质等水溶性成分分散在水层，而将类黄酮成分分散在乙醚层。乙醚层非极性物质，一般可将多种植物的非极性成分例如蜡质、叶绿素等与类黄酮成分一起被提取、分散于其中，而对极性强的槲皮素(quercetin)，杨梅素(myricetin)，这些黄酮醇(flavonol)配醣体化合物的提取则效果较低。乙醚是不能残留于或使用于健康机能性原料提取的溶媒中(有关健康机能性食品机能性原料认定的规定，p13，韩国食品医药品厅告示2007-51)。

而且，第1988-0003630号韩国专利公布了‘活性氧抑制剂组合物及其制造方法’有关将焙煎的植物种子或给其胚芽添加微生物而发酵后，再加入从焙煎的植物获得的油而抑制活性氧的复合植物提取发酵成份的，该组合物包括上述碳水化合物、蛋白质和类黄酮、多酚类、单宁(tannin)、维生素E(tocopherol)、维生素B2等多种高分子、低分子化合物，与本专利申请人所希望的一些机能有类似性，但材料及方法上有明显的区别。

[发明内容]