[实用新型]盐霉素ELISA检测试剂盒

说明书

(一)技术领域：本实用新型涉及检测盐霉素含量的试剂盒，特别是检测动物源性食品中盐霉素含量的酶联免疫试剂盒。

(二)背景技术：盐霉素(Salinomycin)属于聚醚类兽用抗生素，对大多数革兰氏阳性菌和部分霉菌起抗菌作用，单独使用对鸡球虫病能发挥良好的预防效果。但使用盐霉素不可过量，过量使用将会在动物体内大量蓄积，并会使所食用动物中毒死亡，通过食物链而危及人类健康。2002年12月我国农业部公告第235号文规定盐霉素在肌肉中最高残留量为600μg/kg，在皮肤、脂肪中的最高残留量为1200μg/kg，在肝中的最高残留量为1800μg/kg。欧盟自2006年，不再允许盐霉素-钠在饲料中添加。因此，检测盐霉素在动物性食品中的残留量非常重要。

目前，常用于盐霉素残留检测的方法主要有微生物法和仪器分析法。微生物检测法虽然经济、操作简便，但在样本中有其他微生物抑制剂存在时，其灵敏度和特异性受到限制。仪器分析法主要有高效液相色谱分析法(HPLC)、液-质联机(LC-MS)、液质串联质谱法(LC-MS/MS)等，这些方法的前处理过程繁琐、检测费用较高，不宜用于大量样本筛查，推广使用受到限制。

(三)实用新型内容：本实用新型所要解决的问题是提供一种小巧轻便的盐霉素残留量检测试剂盒，其操作简便，检测快速、准确、灵敏度高，成本低，稳定性好，需要的技术含量不高，可进行一次连续多个样品中盐霉素残留量的测定，减少了检测样本所需要的时间。

本实用新型的技术方案是：一种检测食品中盐霉素残留量的酶联免疫试剂盒，包括盒体和盒内的一块96孔的酶标板、一张盖板膜、14瓶试剂和放试剂的下凹瓶位、一个自封袋、一份说明书和一份质检报告，其特征在于：采用96孔聚苯乙烯酶标板作为固相载体，酶标板由外框支撑架及放置其上的可拆的12条酶标反应微孔条组成，每个可拆装酶标反应微孔条有8个反应孔，在试剂盒酶标板微孔条上预包被盐霉素偶联抗原制成检测板，放入真空铝箔袋中，盒体为硬纸盒，以塑料硬膜为盖板膜，将6瓶1ml梯度浓度的标准品溶液、1ml高浓度标准品溶液、12ml酶标二抗、7ml盐霉素抗体工作液、7ml显色液A液、7ml显色液B液、7ml终止液、40ml浓缩洗涤液、50ml浓缩复溶液试剂用不同大小、不同颜色的塑料瓶和玻璃瓶盛装并固定在泡沫塑料模具中与酶标板、盖板膜、自封袋、说明书、质检报告一同封装在硬纸盒内，以便于携带和运输。每一个试剂盒中的试剂足够进行96次测定(包括标准分析孔)，既可进行一次连续多个样品的检测，也可以将板孔拆开多次检测。将剩下的放回铝箔袋中用自封袋密封，这样可以保证试剂盒检测结果的准确性。检测时，样本中的盐霉素将和酶标板微孔条上预包被的盐霉素偶联抗原竞争抗盐霉素抗体，加入酶标二抗后，用TMB底物显色，样本吸光度值与样本中所含盐霉素的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中盐霉素含量，其操作简便易行。

经实验表明本试剂盒具有很高的灵敏度：肌肉/肝脏样本的最低检测限为5μg/kg、蛋类样本的最低检测限为20μg/kg；肌肉/肝脏样本的回收率为75％±10％；蛋类样本的回收率为80％±20％；相对于其他盐霉素检测方法，本试剂盒所需仪器较少，只需要酶标仪、氮气吹干装置、涡旋仪、离心机、振荡机和微量加样器等，同类实验室一般均有配备，所需成本较低。

本实用新型的有益效果是：能快速、简便、灵敏、准确地用于盐霉素残留量的检测。

(四)附图说明：

图1为本实用新型酶联板的侧面纵剖面图(长为8.55cm)；

图2为本实用新型酶联板的侧面横剖面图(长为12.8cm)；

图3为本实用新型酶联板的俯视图；

图4为本实用新型盖板膜平面图；

图5为本实用新型试剂瓶纵剖面平面图；

图6为本实用新型固定泡沫模具的俯视图；

图7为本实用新型盒体与固定泡沫模具的侧视图。

(五)具体实施方式