[实用新型]快速检测H5N1亚型禽流感病毒的胶体金测试试纸条

说明书

技术领域

本实用新型属于预防兽医学检验领域，具体是一种快速检测H5N1亚型禽流感病毒的胶体金测试试纸条。

背景技术

高致病性禽流感病毒(HPAI)是由H5N1型禽流感病毒引起的急性严重呼吸道传染病，其发病率和死亡率极高，是危害禽类的主要烈性传染病之一，被国际兽疫局定为A类传染病。近年来研究发现，高致病性禽流感病毒病毒H5N1可突破种族屏障，感染人类致病甚至死亡。根据世界卫生组织记录，自2003年底至2005年11月14日发生人禽流感病毒疫情130例，67例死亡。其中柬埔寨4例，4例死亡，越南93例，42例死亡，泰国21例，13例死亡，印度尼西亚11例，7例死亡。中国3例，2例死亡。使之成为严重危害人类健康的恶性传染病之一，而且随着禽流感病毒病毒H5N1对人类的不断适应与快速变异，以对人类的健康构成了极大的威胁。因此，建立快速准确的H5禽流感病毒病毒诊断技术，是预防和控制HPAI扩散和侵入的首要环节。

目前，对H5N1病毒的诊断方法，以普通人流感病毒为基础发展起来的主要有病毒分离、血清学诊断以及分子生物学方法。但病毒分离时间长，要求条件高，分离率低；而采集患者急性期与恢复期双份血清进行抗体测定来确认，又不能及时进行诊断，因此，使这两种方法在使用中受到很大的限制。

发明内容

本实用新型的目的是提供一种快速检测H5N1亚型禽流感病毒的胶体金测试试纸条，以解决现有技术存在的病毒分离时间长，要求条件高，分离率低，不能及时进行诊断的问题。

本实用新型的技术方案是：包括底衬、样品垫、涂覆胶体金颗粒标记抗体的玻璃纤维膜、包被膜和吸水纸，包被膜的底面粘帖在底衬上面，在该包被膜两端的上面分别粘帖玻璃纤维膜和吸水纸，在该玻璃纤维膜的另一端的上面粘帖样品垫；在该包被膜的上面设有检测线和控制线，该检测线包被H5N1亚型禽流感病毒的抗体，该控制线包被抗鼠抗体。

所述的H5N1亚型禽流感病毒的抗体为高纯度的抗单克隆抗体和/或多克隆抗体，所述胶体金颗粒标记抗H5N1亚型禽流感病毒的单克隆抗体。

本实用新型采用双抗体夹心法，可用来检测血液样品或者棉拭子等处理样品。与现有检测试剂盒比较，由于对检测线(T线)和控制线(C线)进行了相应的处理(主要是调整了PH值和浓度等)，使其能够产生特异条带，从而满足现地农户、基层检测的需求。

本实用新型具有高度特异性、灵敏度、检测速度等优点，且不需使用仪器设备，成本低廉，操作简便，快速，可以直接判断结果，养殖人员有无兽医基础都可以放根据说明书操作。能广泛应用于现地农户、基层及个人对于H5N1亚型禽流感病毒的检测。该试纸条可以直接使用，也可以装配在塑料装置中以检测板形式使用。

附图说明

图1为本实用新型的侧面结构示意图；

图2为图1的俯视图示意图；

图3为本实用新型检测结果为阳性的示意图(包被膜4表面的检测线6和控制线7均显色)；

图4为本实用新型检测结果为阴性的示意图(包被膜4表面的控制线7显色而检测线6不显色)；

图5为试纸条无效的示意图(包被膜4表面的检测线6和控制线7均不显色)。

具体实施方式

如图1和图2所示，本实用新型包括底衬1、样品垫2、涂覆约20nm厚的胶体金颗粒标记(金标)抗体的玻璃纤维膜3、包被膜4和吸水纸5，包被膜4的底面粘帖在底衬1上面，在该包被膜4两端的上面分别粘帖玻璃纤维膜3和吸水纸5，在该玻璃纤维膜3的另一端的上面粘帖样品垫2。在该包被膜4的上面设有检测线6和控制线7，该检测线6包被H5N1亚型禽流感病毒的抗体，该控制线7包被抗鼠抗体。通过所述检测线6和控制线7的显色来定性。

所述的H5N1亚型禽流感病毒的抗体为高纯度的抗单克隆抗体和/或多克隆抗体，所述胶体金颗粒标记抗H5N1亚型禽流感病毒的单克隆抗体。

本实用新型采用两条带显色的胶体金层析法制备，显带颜色为红色线条，能准确检测出样品中H5N1病毒的含量。具体的制造方法如下：

A.包被膜4的制备：在硝酸纤维素膜上分别喷涂抗H5N1禽流感病毒的抗体及抗鼠IgG抗体，并呈两条线上下排列，分别形成所述的检测线6和控制线7。

检测线6：调试喷膜机，喷液量为25微升/35厘米，用包被缓冲液稀释抗H5N1亚型禽流感病毒的单克隆抗体，浓度为70ug/ul，用喷膜机喷涂划线，室温晾干20分钟；