[实用新型]原位杂交一步式封片胶带

说明书

技术领域

本实用新型属分子细胞生物学技术领域，具体涉及在原位杂交实验的杂交阶段，取代传统的方法，能将加盖玻片与封片步骤同时快速一步完成的胶带。

背景技术

原位杂交是一项应用极广的实验技术，具有很高的敏感性和特异性，不仅是细胞生物学、分子生物学的重要研究手段，而且已进入临床实验诊断领域，如荧光原位杂交(FISH)技术应用于绒毛及羊水间期细胞进行产前诊断。其基本原理是在适宜的条件下，利用单链核酸分子之间有碱基互补配对的规律，以特异序列的单链核酸(DNA或RNA)为探针与细胞内待测的核酸复性结合，然后通过探针上的标记物将待测核酸在细胞中原有位置上显示出来的技术。探针标记物可分为同位素与非同位素两类，由于同位素标记探针具有放射性，存在对环境及人体的危害且受半衰期限制等缺点，现已很少使用，而非同位素标记探针在近年来得到迅速发展，其标记物主要有荧光、生物素和地高辛等。本实用新型主要适用的是非同位素标记探针。

原位杂交根据核酸探针的种类和标记物不同，具体的实验技术也有一定差异，但其基本方法和原则大致相同，主要包括：①杂交前准备，包括取材、玻片和组织细胞的处理、固定、通过酶消化等操作增强后续实验中探针的穿透性、减低背景等；②杂交；③杂交后处理；④显示。杂交是其核心步骤，包括将杂交液(由探针、杂交缓冲液和H₂O组成)滴加于载玻片上杂交区的样品表面、加盖玻片、封片、孵育这几步。加盖玻片的目的，一是盖玻片能使有限的杂交液更充分地与尽可能大的杂交区域接触；二是防止较长时间的孵育过程中温度导致杂交液的蒸发，保证杂交所需的湿润环境。由于盖玻片的四周存在同空气交通的缝隙，在长时间的孵育过程中仍能导致杂交液蒸发，所以国内外常规还要进行封片，即封闭盖玻片与载玻片间的缝隙，彻底避免杂交液蒸发。最常用的方法是在盖玻片周围涂上封片剂Rubber Cement，也有少数人在盖玻片周围加液体石蜡等物质进行封固的。但Rubber Cement是一种有机溶媒溶解生橡胶的粘合剂，具有一定的毒性，长期、大量接触对人体有害，且利用Rubber Cement封片，由于其粘度大，导致要将一张盖玻片封好，耗时长，如技术不好或稍不小心，常致封片质量不高；而利用液体石蜡封片，在杂交时的高温下，液体石蜡融解极易导致杂交液的污染，影响杂交效果。也有个别实验人员在加盖玻片后通过Parafilm封口膜包裹缠绕来封片，但这种封片方法更不容易起到很好的密封效果。上述各种方法杂交完毕都需小心地分别去除封片剂/膜和盖玻片，而由于盖玻片与载玻片杂交区间有吸附力稍有不慎可能因盖玻片的拖动移位造成杂交样品脱片，而且如此繁琐的程序对大批量样品的操作也造成了困难。

发明内容

本实用新型的目的是克服现有的封片技术的不足，为原位杂交实验提供一种使用方便、安全性高、快速且杂交效果好的一步式封片胶带。

本实用新型采用的技术方案是：一种一步式封片胶带，大体呈2.5cmX2.5cm正方形，厚0.02cm-0.04cm，以PVC膜配合高分子胶粘剂作为封片胶带基础结构。胶带仅一面有粘性。在胶带粘性面的中部，有一块直径1.5cm清洁的圆形盖玻片(厚度0.017cm)，盖玻片与PVC膜紧密粘合成一整体结构。整个胶带粘性面由厚0.01cm蜡性覆盖纸覆盖，这种蜡性覆盖纸的作用有二：一是防止封片胶带在储存时与包装纸相互粘在一起，二是可以保持盖玻片的清洁。临用前轻松地撕去蜡性覆盖纸即可使用胶带；胶带的一侧设计成半月形无胶粘部位，利于操作时手握持。PVC胶带透明，封片时以盖玻片所在部位对应载玻片上的杂交区进行封片，可准确将加盖玻片与封片两步合一；由于PVC胶带和盖玻片都是透明的，在封片过程中也能随时观察封片效果，如有无气泡产生等。杂交结束，可一手拿稳载玻片，另一只手的两手指捏住半月形无胶粘部位轻轻用力，即可将封片胶带整体去除，不用再像传统操作一样，在去除封片剂和夹除盖玻片上浪费时间，这样的操作对载玻片上杂交样品不会产生任何影响。PVC胶带粘性持久、防水、遇水不易脱落，有利于杂交过程顺利完成。

这种封片胶带可每张为一个独立包装，方便生产、转运、销售、储存和使用。

与现有技术相比，本实用新型具有以下优点：1.无毒无害；2.对杂交液化学成分无影响；3.加盖玻片与封片一步完成，去除时也一步完成，每张片操作只需几秒钟，省时省力；4.盖玻片与胶带是整体结构，利于更好地把握封片位置；5.不会因盖玻片的拖动移位造成杂交样品脱片；6.标准化程度高，适合大批量实验操作(我们经过数百例实际使用，效果甚佳)；7.如封片胶带大规模生产和使用，其成本大大低于目前传统方法。

附图说明