[实用新型]多波长核酸蛋白层析分离和检测装置

说明书

一、技术领域：

本实用新型是生物化学和生物制药领域的专用分离检测方法与设备，尤其是涉及多波长核酸蛋白层析分离检测方法和系统。

二、背景技术：

在科学研究和生产过程中，存在着大量的蛋白质、核酸和多肽等生物大分子的分析、分离和纯化工作，迫切需要高效快速的分析、分离和制备方法。目前广泛采用的生化分离技术主要有沉淀分离、层析分离、电泳分离、离心分离、膜分离技术。而层析分离技术以其独特的优势始终占据着生物大分子纯化技术的主导地位。层析系统包括两个相：固定相和移动相。当移动相流过加有样品的固定相时，由于各组分在两相之间的分配比例不同，各组分就会以不同速度移动而互相分离开来。根据固定相基质的形式，层析可以分为纸层析、薄层层析和柱层析。生化技术中常用的凝胶层析、离子交换层析等通常采用柱层析方法。柱层析系统主要有两部分组成，层析柱系统和检测器系统。根据研究对象设计层析柱系统，包括柱体、固定相、流动相(洗脱剂)、流速等，已形成专门研究领域。检测器是柱层析系统分析、分离和纯化工作的“眼睛”，主要有紫外(UV)吸收、示差折光、介电常数等。其中紫外吸收检测器是柱层析系统应用最广的检测器，它有①灵敏度高，最低检测浓度可达10^-10g/mL②受操作条件和外界环境影响小，适于梯度洗脱③对无紫外吸收的物质组分无响应④非破坏性检测，可与其他检测器串联使用等特点及优点。既可以用于少量物质的分离鉴定，又可用于大量物质的分离纯化和制备。占据着生物大分子分离纯化技术的主导地位，使用率占70％左右。传统核酸蛋白层析分离装置虽然配有280nm、254nm等波长选择，但实际使用时只能选定单一波长进行检测，因此，传统层析分离装置只能利用物质特征波长分离已知单一组分(蛋白或核酸等)，不能对未知混合组分进行分离，更不能分析蛋白或核酸的纯度。目前使用的大分子层析分离装置由核酸蛋白检测仪、层析柱、恒流泵、部分收集器和记录仪等部件构成。作为一种简便的分析分离手段与方法，长期应用于教学实验、科学研究和工业生产。在零点调整、灵敏度选择、读数换算、使用记录仪描谱等环节的操作基本一样，且仅在单一波长(280nm或254nm)下检测。只能利用物质特征波长分离已知单一组分(蛋白或核酸)，不能对未知混合组分进行分离，更不能分析蛋白或核酸的纯度。传统核酸蛋白检测仪在操作和技术上普遍存在以下几方面不足：1、误差。仪器检测的第一数据为光透过率值。由于仪器的对数转换装置误差没能得到很好的校正补偿，实际转换结果存在较大的误差。虽然要求使用者在进样前一定要进行零点调整，方法为：先调整透过率为100％，然后再调吸光度为0，使该点(T＝100％，A＝0)两者符合了朗伯--比尔定律(A＝1g(1/T))。但是，无法保证在测量范围内(一般取0-2A)都符合朗伯--比尔定律。事实上不同点两者存在着误差，有的误差超过50％。因此，仪器检测的科学性得不到保证。

2、读数.传统检测仪为保证测量时读数在仪器有效测量范围内，在仪器面板上都设有灵敏度选择装置(2.0A、1.0A、0.5A、0.2A、0.1A、0.05A等)，由此会带来：①当对未知样品浓度不甚了解，不知如何选择灵敏度，需要反复摸索；②仪器显示值不是样品吸光度值，真正吸光度值是仪器显示数与灵敏度的乘积；③如在测量时改变仪器的灵敏度将会带来严重后果(基线变化大).

3、繁琐。大多传统检测仪在不同灵敏下的测量结果均为0-10mv直流电压信号，将此信号输出到记录仪上，选择适当的记录仪走纸速度，在记录纸上绘出吸光度谱。可想而知，记录纸上的吸光度并非样品吸光度，也受到仪器灵敏度的调制。要想从记录纸上得到吸收峰的面积、归一化等参数将是一件费工耗时、十分繁琐的事。再者，纸质谱图提供的信息单一且难以保存，更不能直接在文章中插入使用。

4、单一。传统检测仪虽然可能配有280nm、254nm等波长选择，但使用时只能选定单一波长进行检测，不能同时进行双波长(280nm和254nm)同步检测。因此，传统层析分离装置只能利用物质特征波长分离已知组分。需进一步分离未知物质，传统层析分离装置无能为力。

三、实用新型内容：

本实用新型目的是：为彻底解决传统层析分离装置存在的误差大、读数不直观、记录仪描谱、只能单波长检测等问题。提出一种涉及多波长核酸蛋白层析分离和检测系统。