[发明专利]荻的快速繁殖方法有效
申请号: | 200910311386.7 | 申请日: | 2009-12-14 |
公开(公告)号: | CN101711504A | 公开(公告)日: | 2010-05-26 |
发明(设计)人: | 易自力;陈智勇;蒋建雄;黄丽芳;覃静萍;艾辛;王红权 | 申请(专利权)人: | 湖南农业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 长沙市融智专利事务所 43114 | 代理人: | 颜勇 |
地址: | 410128 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 快速 繁殖 方法 | ||
技术领域
本发明属于生物工程领域,涉及植物组织培养技术,具体地说是荻和南荻的组织培养方 法。
背景技术
获[Miscamhus sacchariflorus(Maxim)Benthet Hook。]属于禾本科、禾亚科、黍系 、高粱族、甘蔗亚族、芒属。荻是长江蓄洪湖区多年生的水陆两生植物,是我国重要的造纸 纤维原料,其纤维质量和产量均优于芦苇(Phragmites australis L.),还能防汛、同坝 、编蓆,地下茎及蜡粉可作药材。目前,国际上已将获纳入到有利用价殖和开发前景的“新 经济作物”,由国家资助列项加以研究,中国是世界获类植物资源的分布中心,通过多年 的研究,证明荻属是一类兼具生态效益和经济效益的植物资源。获与甘蔗、水稻都是高光效 的C4植物,植株高大,植物茎秆纤维细胞含量高,是一种可持续利用的高生物量资源。此 外,荻生长快,产量高,易繁殖,能迅速覆盖地面,适宜于荒坡、湖洲发展的先锋植物,有 固土保水,防止冲刷,改善周边生态环境,具有多种用途的资源植物。特产我国的南获新 种,但长期以来,只有少数科研工作者开展了荻类的研究,目前,荻类组织培养已有少量报 道,顾振惠等人曾用荻茎尖培养再生植株(农业现代化研究,1988(4)),茎尖需在实体显 微镜下剥取,操作复杂,而且外植体供体有限。何丽珍等人曾用无菌小苗、下胚轴、根、芽 鞘及幼穗等不同外植体的愈伤组织诱导及植株再生作以报道(西北植物学报,1995,15(4) ),有一个首先培养无菌小苗的过程,然后取小苗的下胚轴、根、芽鞘等部位诱导愈伤组织 ,再以愈伤组织诱导再生苗,周期长,无法很快得到再生植株;而以幼穗作为外植体,受植 株孕穗的时间限制,外植体的供体有限,同样它也需经过诱导愈伤组织,再以愈伤组织诱导 再生苗的过程,同样存在培养周期长的缺点。但本发明专利提供的荻茎段为外植体快速繁殖 方法及其使用的培养基与目前已有报道不同,试管苗培养时间短,出苗快,增殖率高,变异 小,方法更简单,应用价殖高等优点。目前还没有专利申请的报道。
发明内容
本发明的目的是提供荻的快速繁殖方法,该方法非常适合工业化生产,配方效果佳,出 芽快,培养时间短,植株生长旺盛,可操作性强,应用价值高的优点。具有投入少,产出高 的特点。
本发明所述荻的快速繁殖方法,其具体操作步骤如下:
1、外植体的选择与灭菌:选用荻(M.sacchariflorus)优良单株,切取带1-2个腋芽 的茎段为外植体进行培养;首先将腋芽外部包裹的黄叶清除干净,再用无菌水清洗3~4次后 ,在无菌操作台上用70%酒精处理30秒左右,再用0.1%的升汞消毒18-20分钟,用无菌水冲洗 6-7次备用;
2、腋芽的萌发:将灭菌处理后带1-2个腋芽的茎段接种在MS+6-BA0~2.0mg/L培养基中 ,接种瓶内每瓶接种2-4个茎段,在250-300lux光照下培养,保持温度24+2℃,培养3-5天左 右,腋芽开始萌发,7-9天左右形成带叶的小苗;
3、丛生芽诱导及增殖:将小苗切下接种在MS+6-BA2.0-6.0mg/L+IAA0.1-0.5mg/L培养 基中,直至形成丛生芽,28-35天为一个增殖周期,以保持高速度递增,增殖系数为4以上 ;在添加不超过0.5mg/L的NAA增殖培养基上能同步诱导芽和根,生根率达85%以上,只需 32-38天左右形成完整植株;
4、试管苗的移栽:选取根系生长良好的试管苗,放入清水中把根部的琼脂清洗干净, 移栽到天然泥土中,注意保水保湿,移栽1个月后,移栽成活率达到90%以上。
本发明提出的荻的组织培养方法,利用荻带腋芽茎段为外植体,使得外植体取材容易, 一年四季均可取材,而且数量大;采用成熟的茎段做外植体,保证了遗传稳定性;同时克服 了组织培养中,愈伤组织在分化培养基上随着芽的分化而逐渐停止生长,失去增殖能力的弱 点;可防止愈伤组织继代培养过程中,随着培养代数的增加,分化出来的苗出现变异的现象 。本发明方法利用外植体建立,增殖生根同步化这一技术路线,仅需35天左右形成完整植株 ,3~5个月内可获得大量完整植株,实现荻的大规模工厂化育苗。本发明方法获得的试管 苗无需转至生根培养基,即可形成完整植株;因此在培养过程中随着根的出现,即可出瓶移 栽,简化繁殖程序。移栽基质利用天然泥土,方法简单,而且大大降低了移栽成本。本培养 方法出芽快,增殖率高,方法简单,生产成本低,可批量生产,应用价值高。
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