[发明专利]一种橄榄叶提取物的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种橄榄叶提取物的制备方法，尤其涉及一种橄榄苦苷含量大于90％的橄榄 叶提取物的制备方法，属于植物有效成分提取分离技术领域。

背景技术

橄榄(Olea europare Linn)属木樨科(oleaceae)，英文名称为olive，又名洋橄榄、齐 墩果、阿列布，是以“高产、优质、高效”为特征的世界名贵常绿木本油料和果用树种，橄 榄的栽培品种有500种之多，广泛种植的约140种。橄榄生长能力旺盛，耐旱、喜光，主要分 布在欧洲地中海沿岸国家和美国加州地区，50年代少量传入我国，在福建、两广、台湾、四 川、陕西、云南等省区广泛种植。长期以来，主要利用其鲜果加工成为素有“植物油皇后” 之称的橄榄油。现代生物技术分析表明橄榄叶中含有大量的生物活性物质，其抗氧化活性成 分较橄榄果更为突出，尤其是裂环烯醚萜类(橄榄苦苷为主要成分)主要存在于欧洲油橄榄叶 中。

橄榄苦苷具有强力抗菌、抗病毒活性和极强的抗氧化能力，同时具有降血压，降血糖和 抗癌等作用，为苯酚类裂环烯醚萜苷，易溶于水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯，几乎不溶于氯仿 、石油醚、乙醚、苯、四氯化碳，用极性溶剂处理为白色无定形粉末，在乙酸乙酯中可形成 小结晶，熔点87～89℃，分子式C₂₅H₃₂O₁₃，分子量540.51，结构式如下：

针对从橄榄叶中提取分离橄榄苦苷的文献报道很多，但产品的纯度和得率都很低，目前 还没有一种高效、快捷、低成本、适于工业化大生产的从橄榄叶中提取分离橄榄苦苷的方法 。橄榄苦苷易氧化，对温度和光线较敏感，吸湿性很强，而且不易结晶，所以高纯度的橄榄 苦苷不易制备得到，尤其是得率高、适合生产的橄榄苦苷的制备更是很难。处理过程越繁琐 ，橄榄苦苷纯度有所提高但得率却很低，同时也提高了成本，不适用于大生产。中国专利 200410023233公开了一种橄榄叶提取物提取方法，该方法采用水漂洗、二氧化氯消毒、醇提 取、浓缩干燥，制备的提取物有效成分低于35％，不仅没有明确的有效成分，而且含量低， 其药用受到限制。中国专利200710118209.8公开了一种橄榄叶提取物制备方法，采用醇提取 后膜分离技术纯化，橄榄苦苷含量达40％以上，但其成本较高，且不适用于大生产。中国专 利200710107642.1公开了一种橄榄叶提取物生产工艺，将橄榄叶低温避光干燥乙醇或甲醇采 用回流、浸渍、渗漉、超声提取，真空干燥再经膜分离和离子交换分离纯化，得到橄榄苦苷 、总酚及黄酮三种有效成分，但所得橄榄苦苷含量仅2～6％，且离子交换原料没有交代，提 取物物质残留不明。国外也有专利报道橄榄叶提取物的制备方法，美国专利US98101563用 80％甲醇热提取橄榄叶，真空浓缩、粗提取物喷雾干燥，制备橄榄叶提取物，橄榄苦苷含量 低于40％。王成章等报道了一种引种阿斯油橄榄叶中橄榄苦苷提取分离及结构鉴定的方法( 林产化学与工业，2009年6月)，利用60％乙醇提取，然后用石油醚，乙酸乙酯萃取，再经硅 胶柱层析分离，最后用HPLC半制备色谱制得95％的橄榄苦苷单体，其目标是得到橄榄苦苷单 体，没有考虑得率和成本以及有害物质残留，工艺繁琐。在醇提后直接萃取，工作量大，萃 取效率低，浓缩液过滤较困难，硅胶柱层析分离成本较高，且使用了氯仿甲醇体系，氯仿 的毒性很大，在人体内是不可分解的积累性毒性残留，产品的适用范围受到了很大的限制， 其采用的制备型液相色谱是分析型HPLC色谱，可得到mg级产品，适用于研究但不适合于生产 ，从整个工艺看虽制备出了橄榄苦苷单体，但工艺繁琐成本较高，产品得率较低，工艺的利 用价值受到了很大的限制。

发明内容

本发明的目的在于提供一种工艺流程简单、高效、快捷、低成本、适于工业化大生产的 从橄榄叶中提取分离橄榄苦苷的方法。

本发明所采用的技术方案如下：

一种橄榄叶提取物的制备方法，包括以下步骤：

(1)、提取：用极性溶剂对橄榄叶进行提取，橄榄叶质量与极性溶剂体积的比例为1∶ (10～30)(W/V)，提取的过程中加入溶剂体积1％质量的碳酸钙(W/V)，提取温度为50℃ ～80℃，提取时间为5～10h；

(2)、絮凝沉淀：将提取液浓缩至比重1.01～1.10，用水稀释1～2倍，加入待沉溶液 体积1～3％的絮凝剂，搅拌，静置3～5h，离心分离，得橄榄苦苷为主产品的褐色澄清溶液；