[发明专利]一种基于纳米金快速检测牛奶样品中三聚氰胺的方法

说明书

技术领域

本发明属于三聚氰胺检测技术领域，更具体涉及一种基于纳米金快速检测牛奶样品中三聚氰胺的方法。

背景技术

三聚氰胺(melamine)是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，简称三胺，俗称蜜胺、蛋白精。作为一种用途广泛的有机化工原料，三聚氰胺最主要的用途是作为生产三聚氰胺甲醛树脂(MF)的原材料，此外，三聚氰胺还被用作阻燃剂、减水剂、甲醛清洁剂等。由于食品工业中主要通过凯氏定氮法测定氮原子的含量来间接推算食品中蛋白质的含量，近年来，三聚氰胺因其高氮含量(66％)被不法分子添加到食品和饲料中用于提高产品的表观蛋白含量。研究表明，三聚氰胺具有轻微的毒性，但是长期摄入三聚氰胺会造成生殖、泌尿系统的损害以及膀胱、肾脏的结石，并且可以进一步诱发膀胱癌。人为掺杂的过量的三聚氰胺已经导致多起宠物中毒死亡事件，也因此爆发了婴幼儿因食用了含三聚氰胺的奶粉而导致肾结石甚至死亡的恶性事件。因此建立快速的检测方法以确保食品的安全十分重要。

目前用于三聚氰胺检测的国家标准(标准号：GB/T 22388-2008)采用高效液相色谱法(HPLC)、液相色谱-质谱/质谱法(LC-MS/MS)、气相色谱-质谱联用法GC-MS)，这些方法虽然具有较高的灵敏度以及较低的检测限，但是需要进行复杂的样品前处理，检测时间较长，仪器价格昂贵，检测成本高，不适合用于牛奶中三聚氰胺的现场快速筛查。在目前已经公布的三聚氰胺快速检测相关专利中，拉曼光谱的方法(专利号：200910078299.1以及200910078300.0)、电化学的方法(专利号：200810234859.3以及200910029572.1)都需凭借专业的仪器在专业技术人员的操作下才能完成对三聚氰胺的检测。而用于三聚氰胺快速测定的相关仪器(ZL 200820213241.4)、试剂盒(专利号：200810202732.3)、试纸(专利号：200810197094.0)等因其构造复杂，制作过程繁琐，在实际应用中也受到很大的限制。此外，基于抗原抗体免疫反应的免疫学检测技术受生物分子稳定性的影响，对技术人员的操作要求比较高。因此现有的检测方法还不能完全满足食品中三聚氰胺残留检测需要。

发明内容

本发明的目的在于提供一种基于纳米金快速检测牛奶样品中三聚氰胺的方法。解决现有技术中对三聚氰胺的检测操作要求高，检测过程复杂，检测成本高，检测时间长，不能满足大量的食品检验的要求等问题，本发明的方法成本低、操作简便、能够可视化快速检测牛奶中三聚氰胺。

本发明的技术方案基于纳米金快速检测牛奶样品中三聚氰胺的方法，主要为两种：

一：目视比色法

将牛奶样品进行前处理后，加入至纳米金，采用目视比色法，将加入纳米金后的溶液颜色与比色标准系列进行比较，定性判断牛奶中是否含有三聚氰胺；所述比色标准系列的制备为：采用相同体积的含有不同浓度三聚氰胺的经过前处理的牛奶标样，将其加入至纳米金溶液中，每个样品中所含的纳米金量一致，显色反应后，得到比色标准系列。

二：紫外-可见吸收光谱

将牛奶样品进行前处理后，加入纳米金后溶液采用紫外-可见分光光度计测定吸光度，将测定的吸光度值引入标准曲线方程计算得到牛奶中三聚氰胺的含量；所述标准曲线方程：采用相同体积的含有不同浓度三聚氰胺的经过前处理的牛奶标样，将其加入至纳米金溶液中，每个样品中所含的纳米金量一致，显色反应后，采用紫外-可见分光光度计测定在650nm波长和520nm波长处吸光度，将在650nm和520nm处吸光度的比值A₆₅₀/A₅₂₀作为横坐标，三聚氰胺的浓度作为纵坐标，绘制标准曲线并得出标准曲线方程，能够测定的三聚氰胺的浓度含量范围对于液态奶为0～15.2ppm，对于奶粉为0～79.8ppm；标准曲线的制作范围按照液态奶为0～15.2ppm，奶粉为0～79.8ppm，取若干不同浓度的点，在650nm波长和520nm波长处测定吸光度，将在650nm和520nm处吸光度的比值A₆₅₀/A₅₂₀作为横坐标，三聚氰胺的浓度作为纵坐标，绘制标准曲线并得出标准曲线方程。

本发明的显著优点是：