[发明专利]核酸单分子测序方法

权利要求书

1.一种核酸单分子测序方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一，分别检测脱氧腺苷5’一磷酸、脱氧鸟苷5’一磷酸、脱氧胞苷5’一磷酸、脱氧胸苷5’一磷酸、甲基化脱氧胞苷5’一磷酸、腺苷一5’磷酸、鸟苷5’一磷酸、胞苷5’一磷酸和尿苷5’一磷酸的拉曼光谱信号，建立标准曲线；

步骤二，利用外切酶酶切待测核酸分子，检测酶切后产物通过零模波导时受激光激发而发射的拉曼光谱信号；

步骤三，根据步骤一所得标准曲线，将步骤二所得拉曼光谱信号转换为具体的核苷酸，结合外切酶的切割方向，获得待测核酸分子的具体序列。

2.根据权利要求1所述的核酸单分子测序方法，其特征是，步骤二中，所述外切酶为每次只降解1个核苷酸，每秒降解15～1000个核苷酸的外切酶。

3.根据权利要求1所述的核酸单分子测序方法，其特征是，步骤二中，所述零模波导为金属薄膜基底中的圆形纳米孔，内径为50nm，深度为100nm。

4.根据权利要求1所述的核酸单分子测序方法，其特征是，步骤二中，所述零模波导为阵列形式。

5.根据权利要求1所述的核酸单分子测序方法，其特征是，步骤二中，所述拉曼光谱信号进行如下处理：用透镜收集拉曼光谱信号，之后透过滤波器去除杂散的激发光。