[发明专利]黄曲霉毒素快速检测试纸盒及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种对腐生真菌所产生代谢物的检测技术，特别涉及一种黄曲霉毒素快速检测试纸盒及其制备方法。

背景技术

真菌毒素对粮食、饲料的污染是一个全球性的问题，我国是农业大国，人民以谷物为主食的饮食习惯，使真菌毒素的污染问题显得更为突出。黄曲霉毒素是真菌毒素的重要代表之一，对世界上30多个国家和地区进行的调查表明，危害程度排在第一位。黄曲霉毒素是黄曲霉、寄生曲霉等的代谢产物，对人、畜肝脏的损害程度为所有生物毒素之首。黄曲霉毒素容易污染花生、玉米、大米、小麦、豆类、坚果类、肉类、乳及乳制品、水产品等食品，其中花生和玉米最容易受到污染。现已知饲料、食品或培养基中的黄曲霉毒素有AFB₁、AFB₂、AFG₁、AFG₂以及由AFB₁、AFB₂在体内经过羟化而衍生成的代谢产物AFM₁、AFM₂等，在天然污染的食物中以AFB₁的毒性最强，是已知最强的经口致癌物。

黄曲霉毒素超标是我国食品出口频繁遇到的问题，我国每年食品出口因黄曲霉毒素超标而遭受通报扣留屡屡发生，尤其体现在花生、谷物、果仁中。为了降低AFB₁对人类的危害，世界各国不断制定尽可能低的食品中AFB₁的限量标准，通过检验机构进行检测。高灵敏的仪器分析方法和快速有效的免疫分析方法正逐渐被应用于AFB₁的检测。目前测定AFB₁的主要方法有薄层层析法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)、酶联免疫吸附法(ELISA)、免疫亲和层析净化高效液相色谱等。随着经济的发展，尤其是中国加入WTO后，农副产品进出口贸易的扩大，人们对食品质量和健康水平要求的提高，研发并推广简便、快速、灵敏、特异性并适用于样品实地检测的方法势在必行。

免疫胶体金技术是80年代继三大标记技术(荧光素、放射性同位素和酶)后发展起来并固相标记(以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体反应)的一种新型的免疫标记技术。目前已广泛应用于临床诊断，尤其是在医学临床检验中的应用。当前应用较多的免疫胶体金快速诊断技术主要有两种：斑点免疫金渗滤试验和免疫胶体金层析法。该诊断技术最大特点是单份测定、简单快速、特异敏感，像层析试纸条技术，不需任何仪器设备和试剂，几分钟就可用肉眼观察到颜色鲜明的实验结果，并可保存实验结果。免疫胶体金层析技术现已成为当今快速敏感的免疫学检测技术之一，特别适合于广大基层单位、医院、野外作业人员以及大批量时间紧的检测和大面积普查。目前胶体金主要应用于禽流感、家畜疫病、农药残留、食品安全等多个方向，因此该技术具有巨大的发展潜力和应用前景。

因此，基于当前形势的迫切需要，亟需提供一种方便、快捷且敏感度高的检测方法，即研制开发一种快速检测粮食、饲料中的黄曲霉毒素快速检测试纸盒及其制备方法，造福于人类，将是该技术领域科研人员急需深入研究开发的新课题之一。

发明内容

本发明的目的在于克服上述不足之处，提供一种应用效果显著的黄曲霉毒素快速检测试纸盒及其制备方法。

为实现上述目的本发明所采用的实施方式如下：一种黄曲霉毒素快速检测试纸盒，包括塑料壳体和置于其中的试纸条；所述塑料壳体设有加样孔和观测孔；其特征在于：所述试纸条用聚氯乙烯(PVC)作背衬，设有的胶体金试纸条主要由四部分组成：

(1)在试纸条加样区粘贴样品垫；

(2)在样品垫之下，硝酸纤维素膜之上粘贴吸附胶体金抗黄曲霉毒素AFB₁单克隆抗体结合物的玻璃纤维膜(结合垫)，样品垫与玻璃纤维膜连接处有3mm重叠区；

(3)在试纸条中间的测试区粘贴硝酸纤维素膜，在硝酸纤维素膜检测线(T线)区包被黄曲霉毒素AFB₁-OVA复合物，质控线(C线)区包被羊抗鼠IgG抗体，然后再用1％牛血清白蛋白封闭硝酸纤维素膜，硝酸纤维素膜位于玻璃纤维膜之下，硝酸纤维素膜和玻璃纤维膜连接处2mm重叠区；

(4)在试纸条另一端粘贴吸水纸，吸水纸位于硝酸纤维素膜上端，吸水纸与硝酸纤维素膜的连接处有2mm重叠区。