[发明专利]一种类肝素多糖的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种类肝素多糖的制备方法，特别是涉及一种以甲壳素为原料制备与肝素结构相近的高分子化合物——类肝素多糖的制备方法，属于医用高分子领域。

背景技术

心脑血管疾病是世界卫生组织公布的死亡率最高的三大疾病之一，使用抗凝血药物是心脑血管疾病的主要治疗方法。肝素作为常用的抗凝血药物，已经临床使用70多年。但在临床中大约有2.6％的肝素使用者发生自发性出血事故，另外肝素价格昂贵，还存在着来源于动物，易在制备过程中受污染等问题，所以寻找可替代肝素抗凝血药物一直是研究热点。

甲壳素是仅次于纤维素的生物合成量第二丰富的天然多糖，它是N-乙酰基-D-葡胺糖通过β-(1，4)糖苷键连接而成的直链状多糖，壳聚糖是甲壳素脱乙酰产物，也是自然界中唯一发现的聚阳离子的天然多糖。甲壳素/壳聚糖有着与肝素相似的糖链结构，并易于发生与肝素同型的化学修饰，并且具有无毒、生物相容性、生物可降解性等特殊性质，故在抗凝血材料应用的研究中受到广泛关注。目前向甲壳素/壳聚糖中引入硫酸基团是研究类肝素多糖制备的常用方法。然而，由于肝素中还含有2位乙酰基和6位羧基等基团，向壳聚糖中单纯的引入硫酸基团不能最大程度模拟肝素，也有在甲壳素或壳聚糖的6位或2位引入羧甲基基团，但羧甲基基团体积较大影响了其功能的发挥，此外在以甲壳素/壳聚糖为原料的类肝素的制备中目前也不考虑2位乙酰基含量的影响，所制得的类肝素产物在结构上和肝素相差太大，因而其抗凝血活性也难以和肝素相媲美。时至今日，以甲壳素/壳聚糖为原料来最大限度模拟肝素以期获得最佳性能依然是一个十分重要的研究领域。

发明内容

本发明的目的在于弥补现有技术难以得到结构和肝素较为接近，且具有较高抗凝血活性的类肝素多糖的不足，提供一种类肝素多糖的制备方法。

实现本发明目的的技术方案是：一种类肝素多糖的制备方法，包括以下步骤：

(1)磷酸处理：将甲壳素与60wt％～90wt％的磷酸按质量比为1∶10～30的比例混合，室温下搅拌至甲壳素完全溶解，接着在搅拌条件下将该溶液加入到水中，水的质量为甲壳素质量的30～200倍，沉淀后离心分离，再用水洗涤沉淀至中性得到酸处理产物；

(2)6位选择性氧化反应：将酸处理产物分散于水中，水的质量为甲壳素质量的20～50倍，冰浴条件下加入2，2，6，6-四甲基哌啶-1-氧自由基和NaBr固体，2，2，6，6-四甲基哌啶-1-氧自由基和NaBr固体的质量分别为甲壳素质量的0.5％～2％和10％～45％，搅拌至完全溶解后加入3wt％～10wt％的NaClO溶液，NaClO溶液的质量为甲壳素质量的8～30倍，反应过程中使溶液的pH值稳定在9.5～10.8，反应0.5～1小时，然后加入甲醇、乙醇、正丙醇或异丙醇，甲醇、乙醇、正丙醇或异丙醇的质量为NaClO溶液质量的0.05～0.3倍，调节体系pH值至中性，然后将溶液透析或超滤净化，再减压蒸馏浓缩，用甲醇、乙醇、丙酮或乙醚沉淀，将沉淀物真空干燥得到6位选择性氧化反应产物；

(3)脱乙酰反应：将6位选择性氧化反应产物分散在NaOH的乙醇-水溶液中，该NaOH的乙醇-水溶液中NaOH的浓度为10wt％～35wt％，乙醇与水的体积比为4～8∶1，该NaOH的乙醇-水溶液的质量为甲壳素质量的10～30倍，然后在50～70℃搅拌反应0.5～2小时，反应结束后过滤，将产物用水溶解后再调节体系pH值至中性，透析或超滤净化，减压蒸馏浓缩，用甲醇、乙醇、丙酮或乙醚沉淀，真空干燥得到脱乙酰反应产物；