[发明专利]一种微载体固定化脂肪酶及其制备方法无效

专利信息
申请号: 200910242520.2 申请日: 2009-12-17
公开(公告)号: CN101724621A 公开(公告)日: 2010-06-09
发明(设计)人: 张增伟;顾燕松;周浩;张文波;闵瑞 申请(专利权)人: 北京凯泰新世纪生物技术有限公司
主分类号: C12N11/08 分类号: C12N11/08
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 关畅
地址: 100176 北京*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 载体 固定 脂肪酶 及其 制备 方法
【权利要求书】:

1.一种微载体固定化脂肪酶的制备方法,包括下述步骤:

1)脂肪酶复合液的制备:在脂肪酶溶液中加入所述脂肪酶溶液重量的1%~60%的载体合成用组分,混合均匀得到脂肪酶复合液;

2)将步骤1)制备的脂肪酶复合液经喷雾干燥得到微载体固定化脂肪酶;

所述载体合成用组分是预聚物分散到水中得到的溶液、分散液或乳液;所述预聚物是聚丙烯酸酯、聚氨酯或二者任意比例混合的组分;所述百分含量为重量百分含量。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述聚丙烯酸酯是以丙烯酸丁酯、丙烯酸乙酯、丙烯酸甲酯、丙烯酸异辛酯、丙烯酸乙烯酯、甲基丙烯酸甲酯、醋酸乙烯和丙烯酸中两种或三种以上任意组合为单体进行聚合反应得到的共聚物;所述聚氨酯是多异氰酸酯与低聚多元醇的嵌段共聚物;所述低聚多元醇优选为聚醚二醇或聚酯二醇,所述多异氰酸酯为芳香族异氰酸酯或脂肪族二异氰酸酯;所述芳香族异氰酸酯优选为甲苯二异氰酸酯或二苯甲烷二异氰酸酯,所述脂肪族二异氰酸酯优选为六次亚甲基二异氰酸酯。

3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述脂肪酶复合液的脂肪酶活力范围为0~50000U/g溶液但不包括0U/g溶液;优选为3000~20000U/g溶液;特别优选为3000~18000U/g溶液。

4.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法,其特征在于:所述步骤1)中还包括将所述脂肪酶溶液中加入质量百分浓度为1~10‰的通用酶稳定剂,所述通用酶稳定剂为PEG、明胶和海藻糖中的一种或两种以上任意混合;所述载体合成用组分的添加量为所述脂肪酶溶液重量的6%~60%,优选为12%-60%,特别优选为20%-60%;所述百分含量为重量百分含量。

5.根据权利要求1-4中任意一项所述的方法,其特征在于:所述载体合成用组分的含固量为2%~66%,优选含固量为25%~50%。

6.根据权利要求1-5中任意一项所述的方法,其特征在于:所述聚丙烯酸酯优选为下述1)-6)中任意一项所述的共聚物:

1)丙烯酸丁酯、丙烯酸乙酯和甲基丙烯酸甲酯按质量分数比为(1~3)∶(1~4)∶(2~6)的比例聚合反应得到的共聚物;

2)丙烯酸丁酯、丙烯酸乙酯和甲基丙烯酸甲酯按质量分数比为1.1∶1.3∶2的比例聚合反应得到的共聚物;

3)丙烯酸丁酯、丙烯酸乙酯、丙烯酸和丙烯酸异辛酯按质量分数比为6∶4∶3∶2的比例聚合反应得到的共聚物;

4)丙烯酸丁酯、丙烯酸乙酯和甲基丙烯酸甲酯按质量分数比为1∶1∶2的比例聚合反应得到的共聚物;

5)丙烯酸乙酯、丙烯酸丁酯、丙烯酸乙烯酯和甲基丙烯酸甲酯按质量分数比为3∶2∶1∶2的比例聚合反应得到的共聚物;

6)丙烯酸丁酯、丙烯酸乙酯、丙烯酸甲酯和醋酸乙烯按质量分数比为2∶1∶3∶6的比例聚合反应得到的共聚物;

所述聚氨酯优选为下述1)-4)中任意一项所述的共聚物:

1)甲苯二异氰酸酯与聚醚二醇按照物质的量比为3∶2的比例聚合得到的共聚物;

2)甲苯二异氰酸酯与聚酯二醇按照物质的量比为3∶1的比例聚合得到的共聚物;

3)六次亚甲基二异氰酸酯与聚酯二醇按照物质的量比为2∶1的比例聚合得到的共聚物;

4)二苯甲烷二异氰酸酯与聚酯二醇按照物质的量比为9∶2的比例聚合得到的共聚物。

7.根据权利要求1-6中任意一项所述的方法,其特征在于:当所述预聚物是聚丙烯酸酯和聚氨酯混合的组分时,所述聚丙烯酸酯和聚氨酯的质量比优选为(1-4)∶(1-2);更优选为1∶1、3∶2或者4∶1;所述低聚多元醇的重均分子质量为0.4~3.1kDa;所述脂肪酶溶液为脂肪酶发酵液或脂肪酶纯粉水溶液。

8.根据权利要求1-7中任意一项所述的方法,其特征在于:所述喷雾干燥时干燥风在干燥室入口处的温度为100~360℃,优选为126~220℃,最优选为126-210℃;干燥室出口温度为10~98℃,优选为60-90℃;所述方法中,整个喷雾过程时间为60秒以下,优选为10-55秒。

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