[发明专利]小麦的谷蛋白含量快速分析方法

权利要求书

1.一种小麦的谷蛋白含量快速分析方法，将待测小麦样本清选5g～30g 代表性籽粒，利用实验磨磨制全粉，过0.5mm孔径筛网后装入塑料自封口 袋，室温至少静置24h平衡水分，测定含水量，作为被测样本，准确称取 100mg被测样本置于离心管中，从被测样本中由溶剂提取单体蛋白，或同 时提取单体蛋白、可溶性的分子量较低的谷蛋白聚合体后，经离心后弃上 清，使谷蛋白保留在离心管中；在离心管中加入1mL双缩脲试剂，使用 超声波破碎仪处理后，通过谷蛋白组分的显色反应，测定被测样品中的谷 蛋白含量；所述的被测样品中的谷蛋白含量是指被测样品中的谷蛋白总量 或谷蛋白大聚体含量；

其特征在于：

将提取单体蛋白经离心弃上清，再将离心管倒置5min，使谷蛋白保留 在离心管中，在离心管中加入1mL双缩脲试剂，使用超声波破碎仪处理 15s，随即用移液枪转移悬浮液至已装有4mL双缩脲试剂的具盖10mL离 心管中，混匀并立即放入40℃干热烘箱中温浴20min，期间5min、10min 和15min时分别颠倒摇晃一次；取出于4000rpm离心10min，将上清液在 560nm比色，参照本底为双缩脲试剂，将吸光值代入用标准蛋白建立的曲 线方程，计算出被测样品中的谷蛋白总量；

将同时提取的单体蛋白、可溶性的分子量较低的谷蛋白聚合体经离心 弃上清，再将离心管倒置5min，使谷蛋白保留在离心管中，在离心管中加 入1mL双缩脲试剂，使用超声波破碎仪处理15s，随即用移液枪转移悬浮 液至已装有4mL双缩脲试剂的具盖10mL离心管中，混匀并立即放入40℃ 干热烘箱中温浴20min；取出于4000rpm离心10min，将上清液在560nm 比色，参照本底为双缩脲试剂，将吸光值代入用标准蛋白建立的曲线方程， 计算出被测样品中的谷蛋白大聚体含量；

在所述曲线方程中，相关系数r≥0.9998。

2.根据权利要求1所述的小麦的谷蛋白含量快速分析方法，其特征 在于：从被测样本中单独提取单体蛋白的溶剂为70％乙醇；从被测样本中 同时提取单体蛋白与可溶性的分子量较低的谷蛋白聚合体的溶剂为pH 6.90的SDS磷酸缓冲液，所述的单体蛋白包括清蛋白、球蛋白和醇溶蛋白。

3.根据权利要求1或2所述的小麦的谷蛋白含量快速分析方法，其 特征在于：从被测样本中单独提取单体蛋白的方法是：准确称取100mg被 测样本置于1.5mL离心管中，加入1mL 70％乙醇，室温连续震荡30min， 12000rpm离心15min，弃上清；再次加入相同的溶剂，连续震荡15min， 12000rpm离心15min，使被测样本中的单体蛋白充分溶于溶剂中。

4.根据权利要求1或2所述的小麦的谷蛋白含量快速分析方法，其 特征在于：从被测样本中提取单体蛋白与可溶性的分子量较低的谷蛋白聚 合体的方法是：准确称取100mg被测样本置于1.5mL离心管中，加入1mL pH 6.90的SDS磷酸缓冲液，室温连续震荡20min，12000rpm离心15min， 使被测样本中的单体蛋白与可溶性的分子量较低的谷蛋白聚合体充分溶 于溶剂中。

5.根据权利要求1所述的小麦的谷蛋白含量快速分析方法，其特征 在于：超声波破碎仪的探头直径为Φ3mm，所述的超声波破碎仪处理是指： 超声波破碎仪在12W的输出功率状态下进行处理。