[发明专利]一种降解纤维素的曲霉及其生产的菌剂无效
| 申请号: | 200910232525.7 | 申请日: | 2009-12-07 |
| 公开(公告)号: | CN101724570A | 公开(公告)日: | 2010-06-09 |
| 发明(设计)人: | 李顺鹏;赵方圆;黄星;范宁杰;朱建春 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
| 主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C05F11/08;C12R1/66 |
| 代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 张素卿 |
| 地址: | 21009*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 降解 纤维素 曲霉 及其 生产 | ||
一、技术领域
本发明一种纤维素降解菌及其生产的菌剂,属于生物技术领域,是利用微生物的方法降解纤维素,对于农田秸秆腐熟及竹林地稻壳促腐具有较好的应用前景。
二、背景技术
纤维素是世界上最丰富的可再生资源,但一直没有得到充分利用。我国是农业大国,各类农作物秸秆资源十分丰富,但秸秆直接还田后在土壤中分解转化的周期长,难以作为当季作物的肥源。同时,每年约有30%的剩余作物秸秆不能有效处理和利用,在收割季节秸秆被集中焚烧的现象日益突出,污染空气并危害人们的身体健康。上世纪90年代以来,浙江省富阳、临安等竹林地采取稻壳覆盖早出技术,生产反季节竹笋,取得了显著的经济效益。但随着该技术使用年限的延长,也出现了一些问题。长期使用稻壳覆盖的竹林地,竹子地下鞭的生长受到影响,引起烂鞭、烂芽,造成竹林地退化,严重影响竹笋的产量与品质。因此研究农田秸秆、竹林地稻壳的人工快速促腐技术具有重要的意义。使用传统的物化方法,如酸处理、碱处理以及蒸汽加热等方法处理秸秆等纤维素,存在反应条件剧烈、设备昂贵、成本较高、带来新的环境污染等问题。而利用投加纤维素高效降解菌的方法经济、有效,正逐渐成为当前的研究热点。本专利是一株曲霉属真菌,既可以高效降解秸秆,对稻壳也有一定降解能力,对农田秸秆腐熟及竹林地稻壳促腐具有较好的应用前景。
三、发明内容
技术问题 本发明的目的在于针对生产实践中的实际问题和需求,开发研制出一种新型的降解纤维素的微生物菌剂,使用本菌剂可以在7d内降解41.87%的秸秆,31.59%的稻壳,生产和使用成本较低。使用该降解菌剂可以缩短秸秆直接还田后在土壤中被微生物降解的周期,其代谢物可作为作物的肥源。
技术方案 下面为本发明的主要内容:
本发明提供一种纤维素降解菌,其特征在于,该菌株YN1分类命名为曲霉(Aspergillus sp.),2009年11月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,菌种保藏号为CGMCC NO.3446。
用上述的纤维素降解菌生产的纤维素降解菌剂,是通过以下方法生产而成:
1〕将权利要求1所述的菌株YN1接种于PDA平板培养基上培养3-5天,取自PDA平板培养基上生长的菌落接种于PDA液体培养基中,振荡培养2天;PDA平板培养基配制为马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂15克,水1000毫升;PDA液体培养基配制为,马铃薯200克,葡萄糖20克,水1000毫升。
2)将上述培养好的菌种按种子罐培养基的体积比10%接种量接种入0.5吨种子罐,培养至1亿个/ml,种子罐所用的质量百分比培养基配方为:蛋白胨0.3%,NH4NO30.2%,酵母粉0.05%,KH2PO40.4%,MgSO4·7H2O 0.03%,CaCl2·2H2O0.03%,吐温-800.02%,羧甲基纤维素钠CMC-Na 1%,pH6.0;
3)将种子液按生产罐培养基的体积10%接种量接入生产罐培养,生产罐所用培养基与种子罐培养基相同;
4〕在种子罐和生产罐的培养过程中无菌空气的通气量为:0.6-1.2,搅拌速度为160-170转/分,培养温度为28-32℃,全流程培养时间为48-72小时,发酵结束后菌体的有效活菌数达到1亿个/ml以上,发酵完成后培养液出罐直接用塑料包装桶分装成液体剂型或采用泥炭吸附用包装袋分装成固体菌剂剂型。
有益效果
本发明与现有技术相比具有有如下优点:
YN1菌株既可以高效降解秸秆,对稻壳也有一定降解能力,对农田秸秆腐熟及竹林地稻壳促腐具有较好的应用前景。
YN1菌株经液体发酵培养,内切酶、外切酶、β-糖苷酶、木聚糖酶活及总纤维素酶活性分别为95.7U/mL、14.6U/mL、20.5U/mL、71.6U/mL和26.6U/mL。YN1菌株经固体发酵培养,内切酶、外切酶、β-糖苷酶、木聚糖酶活和总纤维素酶活性分别为1192.2U/g、100.6U/g、136.9U/g、1118.0U/g和210.7U/g。YN1在7d内可降解41.87%的秸秆,31.59%的稻壳。
发酵条件简单,操作方便,成本低廉,易于扩大化生产。
四、具体实施方式
以下叙述本发明的实施例。
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