[发明专利]一种酶解小麦蛋白制备小麦蛋白源阿片活性肽的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种利用蛋白酶酶解制备小麦蛋白源阿片活性肽的方法，属于 小麦蛋白深加工技术领域。

背景技术

小麦面筋蛋白俗称谷朊粉，是小麦淀粉生产的副产品，目前主要用于食品 与饲料工业中，如作为面粉品质改良剂，螃蟹、甲鱼等的饲料粘结剂，营养添 加剂等。随着面筋产量的持续增大，其传统市场已趋饱和，并造成过剩。因此 开发小麦面筋蛋白的新用途势在必行。

食物蛋白源生物活性肽是现代营养学及食品学研究的热点和极具发展前景 的功能因子，近年来受到广泛重视。目前已从各种食物蛋白的不同酶解产物中 分离鉴定出阿片肽、血管紧张素转化酶抑制肽(降压肽)、免疫调节肽、抗菌肽、 抗血栓肽、矿物元素吸收促进肽、降胆固醇肽等。这些活性肽的组成氨基酸并 不一定是必需氨基酸，这使得那些原本认为生物价不高的蛋白质资源能够得到 更充分地利用，成为能更好满足人类保健需要的基料。

阿片肽是一类通过与阿片受体结合而发挥阿片样生理作用的小分子生物活 性肽，具有抗腹泻，促进摄食，镇痛，镇静，调节睡眠，缓解压力与紧张，抑 制胃肠道运动和消化液的分泌，促进电解质的吸收，调节内分泌，抑制细胞分 裂和分化，调节免疫功能，影响生殖与泌乳，调节心血管系统等许多生理功能， 而且其毒性远较吗啡小，是一类有前途的安全有效的治疗药物。因此，阿片肽 在医药及动物生产领域具有非常广阔的应用前景。

阿片肽分为内源性阿片肽和外源性阿片肽两种。目前研究较多的外源性阿 片肽主要是来源于食物中蛋白质水解后产生的小肽片段，它们同内源性阿片肽 (EOP)或吗啡类药物一样具有阿片活性，能参与调节动物的生理活动。外源阿 片肽广泛存在于食物蛋白质序列中，如小麦、大豆、大米、牛奶、血等蛋白序 列中含有许多具有阿片活性的肽段，这些食物在消化过程中释放出阿片肽，并 可能被小肠完整吸收。它们可刺激胰岛素和消化道生长抑素的分泌、调节动物 行为、促进肠道吸收水分和电解质、调节消化道运动、刺激摄食、抑制呼吸和 调整睡眠模式等。

这类外源阿片肽类最早是在酪蛋白酶解产物中被发现的，也是目前研究最 深入的一类。1979年，Brantl等首先报道豚鼠在饲喂一种酪蛋白酶解制剂时， 回肠纵行肌毛细血管中存在一种呈阿片肽活性的物质，命名为β-酪啡肽-7 (β-Casomorphin-7，β-CM-7)，它是含有7个氨基酸残基的寡肽 (Tyr-Pro-Phe-Pro-Gly-Pro-Ile)，它与μ型受体具有良好的亲和力，并呈现出阿片 肽类所具有的特征，如依赖性、呼吸抑制性等。之后又分离得到β-CM-7的前体 β-CM-11(Tyr-Pro-Phe-Pro-Gly-Pro-Ile-Pro-Asn-Ser-Leu)，在多种动物的乳蛋白中 具有保守性。几种肽链较短的β-CM均是十一肽自羧基端水解不同数目的氨基酸 残基后的产物，它在阿片肽受体分析中显示很高的亲和性。这种肽被认为可能 直接作用于消化道中的阿片肽受体以影响胃肠道的运动或者作为胃肠道激素的 外源性调节剂，也可能在小肠刷状缘降解成更小的疏水性阿片肽，穿过肠粘膜 进入外周血液，再透过血脑屏障与脑中的阿片肽受体结合，即使是成年人在大 量饮用牛奶后，其小肠内容物中也能检测到显著量的这种阿片肽的免疫反应物。

近些年来，研究者对酶法增溶小麦面筋蛋白进行了大量研究，面筋蛋白的 溶解性直接影响着其起泡和乳化等功能特性。但对小麦面筋蛋白源生物活性肽 的研究报道较少，尤其是对于小麦蛋白源阿片肽的制备及其性质还未见报道。

发明内容

本发明提供了一种通过酶水解小麦蛋白制备阿片活性肽的工艺，获得的肽 含量高，阿片活性高，促进了谷朊粉的综合利用。

本发明的技术方案：一种酶法制取小麦蛋白源阿片活性肽的方法，所述方 法步骤为：

(1)配制小麦蛋白浆料：以小麦蛋白为原料，加水调至小麦蛋白质量浓度 为5％-6％；

(2)第一步酶解：调整pH值为1.5～2.0，温度为36～38℃，添加胃蛋白酶 酶解，加酶量为小麦蛋白重量的1.0％～1.5％，酶解时间9～24h；

(3)第二步酶解：再调节pH值为8.3～8.7，添加胰蛋白酶在温度46～48℃ 酶解或添加胰酶在36～38℃酶解，加酶量为小麦蛋白重量的0.5％～1.0％，酶解 4～6h；