[发明专利]从红枣中提取环磷酸腺苷的工艺方法

说明书

技术领域：

本发明属于一种食物提取物的提取工艺，特别涉及一种从红枣中提取环磷酸腺苷的工艺方法。

背景技术：

枣树在我国栽培面积超过1000万亩，占世界栽培总面积的99％。红枣属药食两用果实，红枣中含有丰富的环磷酸腺苷(CAMP)。环磷酸腺苷(CAMP)和环磷酸鸟苷(CGMP)为细胞传递激素和递质作用的中介因子，是细胞内激素活动的第二信使，参与糖、脂肪、蛋白质等多种物质的代谢。环磷酸腺苷(CAMP)有抑制癌细胞生长和使癌细胞转为正常细胞的作用，可用于冠心病的心绞痛、心肌梗塞的心原性休克的治疗，并能改善风湿性心脏病的心悸、气急和胸闷等症状，能缓解白血病，对治疗牛皮癣也有一定的疗效。环磷酸腺苷(CAMP)的衍生物葡甲胺环磷酸腺苷(商品名称心先安)由环磷酸腺苷和葡甲胺按1∶1比例直接成盐，该药已广泛用于临床心脏病的治疗。

环腺苷酸是枣果中特色最为突出的重要生物活性物质，是所有已测动植物材料中最高的，为一般动植物材料环腺苷酸含量的数干至数万倍，颇具开发利用价值。

目前无论是国外还是国内，对红枣cAMP的研究还处于实验室研究阶段，都没有进行产业化开发，所以直到现在还没有从红枣提纯的cAMP产品问世。目前市场上cAMP都是化学合成的产品，毒副作用较大，而国内外对红枣cAMP的研究还处于实验室研究阶段，都没有进行产业化开发，所以直到现在还没有提纯的红枣cAMP产品问世。随着人们生活质量的提高，环保意识增强，红枣cAMP研发在功能食品行业有广阔的市场需求，其社会效益，环境保护效益十分明显。

目前，国外实验室提取环磷酸腺苷(CAMP)的工艺过程存在如下缺陷：1、是采用美国的Dowex I型树脂，该树脂为200-400目仅做为实验室研究用，且价格昂贵。2、提取cAMP，甲酸洗脱液用量小，又经NH₄OH中和，不予回收，直接排放既浪费又造成环境污染。3、采用薄层色谱纯化cAMP，该方法须将硅胶板上cAMP区带刮下后再行分离出cAMP，不但操作繁琐，而且不适合工业化生产。4、因提取cAMP仅限于实验室研究，甲酸洗脱液量少，未见使用膜分离技术。

发明内容：

本发明的目的就在于提供一种从红枣中提取环磷酸腺苷的工艺方法，该方法从红枣中提取的环磷酸腺苷纯度高、适合工业化生产，并且生产效率高、生产成本低、不污染环境。

本发明的技术方案是：一种从红枣中提取环磷酸腺苷的工艺方法，其特征在于：依次是：(1)将大枣浸泡、打浆后用65-75摄氏度的热水提取3-5次后加入果胶酶进行酶解、浸提、压滤后得到枣汁；(2)将枣汁放入搅拌罐中与阴离子交换树脂混合搅拌进行特异性吸附，得到结合枣汁中的环磷酸腺苷(CAMP)的阴离子交换树脂；(3)将结合后的树脂充入上层分析柱中用甲酸溶液洗脱，得到甲酸洗脱液；(4)将甲酸洗脱液经旋转蒸发器蒸馏出甲酸或经膜分离出来甲酸，截留物即包含环磷酸腺苷(CAMP)；(5)采用硅胶柱层析纯化技术将截留物进行纯化，得到高纯度的环磷酸腺苷(CAMP)。

上述阴离子交换树脂采用205×7型80-100目强碱型阴离子交换树脂。

上述膜采用150nm纳滤膜。

上述果胶酶由果胶裂解酶、果胶甲酯化酶和聚半乳糖醛酸梅组成，其重量配比是7∶1∶1。

上述果胶酶的用量是：0.6-0.7g/L。

本发明具有如下的优点和积极效果：

1、采用205×7型80-100目强碱型阴离子交换树脂，该树脂适用于工业化生产，且价格较便宜(150元/kg)。

2、建立了甲酸含量测定方法，通过测定经旋转蒸发器蒸馏出来的甲酸或经膜分离出来的甲酸洗脱液，其浓度接近0.5N，调整便可回收再利用，这样不仅降低了成本，更主要的是避免了甲酸排放造成的环境污染。

3、采用硅胶柱层析技术替代薄层色谱得到高纯度的cAMP，适合工业化生产。

4、引入150hm纳滤膜技术，可快速将小分子物质(主要是甲酸)，分离出去，使用膜分离技术，大大缩短了工艺流程的周期，提高了工作效率。

5、提取出的环磷酸腺苷(CAMP)纯度不低于95％，收率不低于70％，重金属含量不大于10ppm，砷含量不大于1ppm。

具体实施方式：

将大枣浸泡、打浆后用65-75摄氏度的热水提取3-5次后加入果胶酶进行酶解、浸提、压滤后得到枣汁；(2)将枣汁放入搅拌罐中与用205×7型80-100目强碱型阴离子交换树脂混合搅拌进行特异性吸附，得到结合枣汁中的环磷酸腺苷(CAMP)的阴离子交换树脂；(3)将结合后的树脂充入上层分析柱中用甲酸溶液洗脱，得到甲酸洗脱液；(4)将甲酸洗脱液经旋转蒸发器蒸馏出甲酸或经150nm纳滤膜分离出来甲酸，截留物即包含环磷酸腺苷(CAMP)；(5)采用硅胶柱层析纯化技术将截留物进行纯化，得到高纯度的环磷酸腺苷(CAMP)。