[发明专利]团头鲂与翘嘴红鲌远缘杂交的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种鱼类杂交方法，尤其涉及一种鲤科鲌亚科鱼类中的远缘杂交方法。

背景技术

杂交技术是改良鱼类性状常用的方法，亲缘关系在种间或种间以上的杂交一般称为远缘杂交。远缘杂交作为一种重要的鱼类遗传育种和性状改良方法，它可以整合整套外源基因，从而改变杂交后代基因的表达调控，使得杂交后代可能在生长速度、抗逆性、抗病性以及肉质等方面表现出杂种优势。如红鲫与湘江野鲤的属间远缘杂交形成的杂交后代具有生长速度快、肉质鲜嫩、抗病力强、存活率高等优点；红鲫与团头鲂的亚科间远缘杂交形成的杂交后代除具有鲫鲤杂交鱼以上优点外，体背还明显增高，外形优美，具有良好的经济效应。如何利用和改进现有的生物学技术和方法来对现有的自然鱼种进行遗传改良以获得形状更为优良、品种更加丰富和对遗传研究更有意义的新型多倍体鱼，就成为本领域技术人员长期面临和需要解决的问题。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种受精率高、孵化率高、后代性状优良、对遗传育种具有重要意义的团头鲂与翘嘴红鲌远缘杂交的方法。

为解决上述技术问题，本发明提出的技术方案为一种团头鲂与翘嘴红鲌远缘杂交的方法，包括以下步骤：首先挑选性腺成熟、无病无伤、体征良好的雌性团头鲂(母本亲鱼)和雄性翘嘴红鲌(父本亲鱼)作为亲鱼进行专池培育，然后在繁殖季节对所述亲鱼进行人工催产，选择催产效果良好的亲鱼进行人工干法授精，授精完成后的胚胎进行培养皿静水孵化，对孵化完成后的鱼苗进行饲养，再对饲养后的实验鱼进行检测、筛分，获得团头鲂与翘嘴红鲌杂交三倍体鱼和二倍体鱼。

上述团头鲂与翘嘴红鲌远缘杂交的方法，具体包括以下步骤：

1)亲鱼的选择和培育：在繁殖期前5～6个月，挑选体重1kg以上、性成熟特征明显、体征良好的雌性团头鲂和雄性翘嘴红鲌作为远缘杂交的亲鱼进行专池培育，在繁殖期前一个月左右每隔2～3天流水刺激一次，以促进所述亲鱼的性腺发育成熟；体征良好的亲鱼一般表现为体型好、体色鲜艳、体质健壮、无病无伤；

2)人工催产：在所述繁殖期当年的5月下旬至6月下旬，水温稳定在23℃～25℃时，为所述亲鱼注射黄体素释放激素类似物(LRH-A)与绒毛膜促性腺激素(HCG)的混合催产剂进行催产，先注射母本亲鱼，所述LRH-A的用量为10μg/kg，HCG的用量为600IU/kg；4～5h后再注射父本亲鱼，父本亲鱼的注射剂量减半；注射完毕后按1∶(1.5～2.5)的数量比将母、父本亲鱼放入同一水面面积为80m²左右的产卵池中，然后根据水情及时向池中冲水，在产卵前3～4h注入一定水量后，停止注水，让所述亲鱼在静水中催产，直至其开始顺利产卵和产精；注射时优选采用胸鳍基部无鳞处腹腔一针注射法，以提高亲鱼的存活率；

3)授精孵化：挑选产卵量大、产卵质量高的母本亲鱼和产精量大的父本亲鱼进行人工干法授精，受精卵置于水温为23℃～24℃的培养皿中进行静水孵化；

4)饲养：鱼苗全部孵出后，先于网箱中培育1～2天，待鱼苗出现腰点、开始平游后将鱼苗转入预先培肥的池塘中饲养，3～4天后泼洒豆浆，每天泼洒2～3次，泼洒时力求细、匀，实验鱼长成后经检测、筛分获得团头鲂与翘嘴红鲌杂交三倍体鱼和二倍体鱼。

上述团头鲂与翘嘴红鲌远缘杂交的方法中，对所述长成后的实验鱼进行检测的具体方法是指利用流式细胞DNA含量测定法和外周血细胞培养的染色体倍性检测方法对实验鱼进行DNA含量和染色体数目的检测。本技术方案中用流式细胞DNA含量测定法和外周血细胞培养的染色体倍性检测方法来检测实验鱼具有不杀死实验鱼、准确、快速、试验结果清晰的优点。

上述技术方案中的团头鲂(Megalobrama amblycephala)属于鲤科、鲌亚科，鲂属中的二倍体鱼(2n＝48)，体高侧扁，尾柄高而短，体型优美，草食性，生长速度快，肉质细嫩、腴美，脂肪丰富；翘嘴红鲌(Erythroculter ilishaeformis Bleeker)隶属于鲤科，鲌亚科，鲌属中的二倍体鱼(2n＝48)，为大型淡水经济鱼类，生长迅速，耐低氧，适应性与抗病力极强，常年摄食(含严冬季节)，肉质洁白鲜嫩，营养价值高，深受人们的青睐。本发明通过反复实验最终选择团头鲂为母本，翘嘴红鲌为父本进行远缘杂交获得了具备多种杂交优势的新型三倍体、二倍体杂交鱼类。相比同类杂交试验，其受精率和孵化率得到了显著提高。杂交后代整合了父母本体形优美、生长迅速、肉质细嫩、营养价值高等优良性状，并且成功地解决了远缘杂交后代不能存活或存活率较低的问题。