[发明专利]转基因木瓜品系16-0-1的核酸分子及其检测方法及应用无效

专利信息
申请号: 200910226181.9 申请日: 2009-11-24
公开(公告)号: CN102071208A 公开(公告)日: 2011-05-25
发明(设计)人: 叶锡东;郑樱慧;包慧俊;范宗宸;龚怡蓉;陈述;苏天财 申请(专利权)人: 叶锡东;郑樱慧;包慧俊;范宗宸;龚怡蓉;陈述;苏天财
主分类号: C12N15/40 分类号: C12N15/40;A01P1/00;C12N15/11;C12Q1/68;C12R1/94
代理公司: 北京戈程知识产权代理有限公司 11314 代理人: 程伟
地址: 中国台*** 国省代码: 中国台湾;71
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摘要:
搜索关键词: 转基因 木瓜 品系 16 核酸 分子 及其 检测 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种分离的具有广泛性抗木瓜环斑病毒特性的转基因木瓜品系16-0-1的核酸分子,其具有:一位于5’端的右边界旁侧区域,一位于3’端的左边界旁侧区域,以及一位于右边界旁侧区域与左边界旁侧区域之间的含有木瓜环斑病毒外壳蛋白基因的转基因序列,其中右边界旁侧区域包含一与SEQ ID NO:29所示序列具有90%同源性的序列;左边界旁侧序列包含一与SEQ ID NO:31所示序列具有90%同源性的序列;而该转基因序列系包括一木瓜环斑病毒外壳蛋白基因以及一可操作的连结于木瓜环斑病毒外壳蛋白基因上游的启动子。

2.根据权利要求1所述的核酸分子,其中该启动子为花椰菜镶崁病毒35S启动子。

3.根据权利要求1所述的核酸分子,其中该转基因序列进一步包括一抗生素抗性基因以及一终止子。

4.根据权利要求1所述的核酸分子,其中该转基因序列系包含一与SEQ ID NO:33所示序列具有90%同源性的序列。

5.根据权利要求1所述的核酸分子,其是由下列者所构成:一位于5’端的右边界旁侧区域,一位于3’端的左边界旁侧区域,以及一位于右边界旁侧区域与左边界旁侧区域之间的含有木瓜环斑病毒外壳蛋白基因的转基因序列,其中右边界旁侧区域具有如SEQ ID NO:29所示序列;左边界旁侧序列具有如SEQ ID NO:31所示序列;而该转基因序列具有如SEQ ID NO:33所示序列。

6.一种用于扩增转基因木瓜核酸序列的引物,其系选自于由下列所构成的群组:

一具有如SEQ ID NO:29所示序列或其互补序列之中的至少10个连续序列的核酸片段;以及

一具有如SEQ ID NO:31所示序列或其互补序列之中的至少10个连续序列的核酸片段。

7.根据权利要求1所述的引物,其系选自于由下列引物所构成的群组:Papa31引物,其具有如SEQ ID NO:17所示序列;以及Papa57引物,其具有如SEQ ID NO:20所示序列。

8.一种用于检测转基因木瓜品系16-0-1的方法,其包括:

提供一木瓜核酸样品以及一引物对,其中该引物对包括一正向引物以及一反向引物;

令该木瓜核酸样品与该引物对形成一聚合酶链反应混合物,进行扩增反应,得到一扩增反应产物;以及

检测扩增反应产物,其中如有一预定大小的扩增片段存在,则代表该木瓜核酸样品含有源自于转基因木瓜品系16-0-1的基因组DNA;其中

该正向引物系选自于由下列者所构成的群组:一具有如SEQ ID NO:29所示序列之中的至少10个连续序列的核酸片段;一具有如SEQ ID NO:33所示序列中的至少10个连续序列的核酸片段;以及它们的互补序列;以及

该反向引物系选自于由下列者所构成的群组:一具有如SEQ ID NO:31所示序列的互补序列之中的至少10个连续序列的核酸片段;一具有如SEQ ID NO:33所示序列的互补序列中的至少10个连续序列的核酸片段;以及它们的互补序列。

9.根据权利要求8所述的方法,其中该正向引物系选自于由下列者所构成的群组:一具有如SEQ ID NO:29所示序列之中的至少10个连续序列的核酸片段;一具有如SEQ ID NO:33介于第4468至5468核苷酸位点的序列之中的至少10个连续序列的核酸片段;以及它们的互补序列;以及

该反向引物系选自于由下列者所构成的群组:一具有如SEQ ID NO:31所示序列的互补序列之中的至少10个连续序列的核酸片段;一具有如SEQ ID NO:33介于第1至1000核苷酸位点的序列的互补序列之中的至少10个连续序列的核酸片段;以及它们的互补序列。

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