[发明专利]奶山羊MFG-E8基因的单核苷酸多态性及其检测方法无效
申请号: | 200910219002.9 | 申请日: | 2009-11-17 |
公开(公告)号: | CN101705288A | 公开(公告)日: | 2010-05-12 |
发明(设计)人: | 陈宏;屈玉娇;蓝贤勇;刘艳丽;李转见;陈忠琦;淮永涛;雷初朝;胡沈荣 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人: | 陆万寿 |
地址: | 712100 陕*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 山羊 mfg e8 基因 核苷酸 多态性 及其 检测 方法 | ||
1.奶山羊MFG-E8基因的单核苷酸多态性,其特征在于,其基因单核 苷酸多态性包括:
在奶山羊MFG-E8基因第12892bp为C或T的碱基多态性。
2.权利要求1所述的奶山羊MFG-E8基因单核苷酸多态性的检测方法, 其特征在于,以包含MFG-E8基因的待测奶山羊全基因组DNA为模板,以 引物对P为引物,PCR扩增奶山羊MFG-E8基因;用限制性内切酶EcoRV 消化PCR扩增产物之后,再对酶切后的扩增片段进行聚丙烯酰胺凝胶电泳; 根据聚丙烯酰胺凝胶电泳结果鉴定奶山羊MFG-E8基因第12892nt的单核苷 酸多态性;
根据聚丙烯酰胺凝胶电泳结果鉴定奶山羊MFG-E8基因第12892nt的单 核苷酸多态性为:TT基因型表现为195bp一条带;TC基因型表现为195bp、 175bp和20bp三条带;CC基因型表现为175bp和20bp两条带;其中,单 核苷酸多态性CC基因型为同义密码子突变;
所述的引物对P为:
上游引物:cctactacgc acgactggat at 22;
下游引物:acaaggctca aagaaactcc 20。
3.如权利要求2所述的奶山羊MFG-E8基因单核苷酸多态性的检测方 法,其特征在于,所述的PCR扩增反应程序为:
94℃预变性4min;94℃变性30s,℃56℃退火30s,72℃延伸20s, 30~35个循环;72℃延伸10min。
4.如权利要求2所述的奶山羊MFG-E8基因单核苷酸多态性的检测方 法,其特征在于,所述的聚丙烯酰胺凝胶电泳为10%聚丙烯酰胺凝胶电泳。
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