[发明专利]CGI-135基因在早期判断急性髓系白血病预后中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及引物在制备检测CGI-135基因试剂中的应用。

背景技术

急性髓系白血病（Acute Myeloid Leukemia，AML）是一种异质性髓细胞肿瘤，也称急性非淋巴细胞性白血病，常进展迅速,其特点是由造血干细胞恶变而形成的原始细胞克隆取代了正常骨髓造血。由于白血病细胞代替了正常血细胞，它们不具备正常血细胞的功能，由此导致贫血，血小板和粒细胞减少而引发一系列并发症。若不经过治疗，存活期一般不超过半年。有的病例从诊断到死亡，甚至不过一周，死亡的主要原因是出血和感染。

目前标准化疗可以获得约70~80%的完全缓解(Complete Remission，CR)率，但大部分CR后的患者终将复发，甚至一部分患者难以达到CR而成为难治性白血病，治疗无效而死亡。

目前对AML的预后判断主要根据患者年龄、染色体核型等指标。但即使是年龄、染色体核型等因素完全相同的患者，他们的预后也不尽相同。因此，为了获得更好的治疗效果，提高患者的存活率，需要早期判断AML的预后指标指导制定合适的治疗方案。故寻找早期判断预后的敏感性指标具有重要现实意义。但是，现阶段有效的判断指标严重不足，从基因水平上研究寻找预后相关的指标已成为研究热点。

发明内容

本发明的目的在于提供引物在制备检测CGI-135基因试剂中的应用。

发明人通过成熟的荧光定量PCR技术研究发现，CGI-135 mRNA急性髓系白血病患者细胞中均有表达。通过荧光定量PCR检测了77例初次诊断并治疗前的急性髓系白血病患者骨髓单个核细胞的CGI-135mRNA表达量，并设立缺铁性贫血、特发性血小板减少性紫癜患者为对照。将所测结果与临床特征、治疗反应及随访结果分析比较，发现CGI-135表达mRNA量大于1.5%的患者，其复发、难治的比例显著高于表达量小于1.5%的患者。CGI-135 mRNA表达量大于1.5%患者的生存期也显著缩短，随访1年时，其总生存率仅为48%，而CGI-135 mRNA表达量小于1.5%患者的总生存率高达78%。由此表明，CGI-135 mRNA表达量的多少，与患者病情未来的发展密切相关：表达量高，患者治疗后易复发且治疗难度大；表达量低则与之相反。

可见，CGI-135 mRNA的表达量可以作为判断AML患者预后的指标，为个体化治疗方案的设计提供了理论依据。

附图说明

图1是CGI-135mRNA表达水平与AML患者生存时间的关系图；

图2为基因PCR产物的电泳图，图中，M为标记带，1为β-actin产物带，8为CGI-135产物带；

图3是cDNA相对浓度梯度—ΔCT关系图。

具体实施方式

选取南方医院血液科2005年9月至2008年7月期间诊治的初发AML患者77例，根据临床表现、细胞形态学和免疫分型及细胞遗传学特征全部符合原发性AML诊断标准，记为病例组，其特征如表1所示；选取20例非恶性血液病患者为对照，诊断及疗效标准参照张之南《血液病诊断及疗效标准》。病例组中，48例患者随访1年以上。

77例中细胞表面抗原CD33、CD13共同表达47例，伴随CD34表达55例，伴随CD14、CD11b表达17例，伴随淋系抗原表达（CD7、CD9、CD19、CD20）35例。

完成染色体核型分析的有57例，染色体异常的17例，其中t(15;17) 3例，t(8;21) 3例，t(8;21)伴-X 2例，t(8;21)伴-Y 2例，t(2;17) 1例，t(11;17) 1例，t(3;5) 1例，+8 1例，+8伴19q22缺失1例，+10 1例，+21 1例。

首次诱导化疗方案均采用标准剂量DA（柔红霉素 + 阿糖胞苷）方案（M3患者予以全反式维甲酸联合化疗），再次诱导未获得CR者改用FLAG（氟达拉滨30mg/m2 d1-5  + 阿糖胞苷1g/m2 d1-5）、CAG（阿糖胞苷10mg/m2 d1-14 + 阿克拉霉素10mg/m2 d1-4）等方案，获得CR后采用TA（吡柔比星20mg/m2 d1-3 + 阿糖胞苷150mg/m2 d1-7）、MA（米托蒽醌8mg/m2 d1-3 + 阿糖胞苷150mg/m2 d1-3）、DA、中剂量阿糖胞苷(2g d1-5)治疗方案交替使用，有5例行自体干细胞移植，3例异基因干细胞移植。CR后治疗疗程中位数4（0~14），随访中位时间374（3-1440）天。