[发明专利]扶正化瘀五味子、虫草菌丝粉中间体指纹图谱质量检测方法

说明书

技术领域

本发明属五味子、发酵虫草菌粉中间体质量检测领域，特别是涉及一种扶正化瘀五味子、发酵虫草菌粉中间体指纹图谱质量检测方法。

背景技术

扶正化瘀药物组合物是由丹参、发酵虫草菌粉、桃仁、松花粉、绞股蓝、五味子六味药组成。目前上市有两种剂型：(1)扶正化瘀胶囊：2002年获得中国国家新药证书(国药证字Z20020053)，并批准国家药品标准WS₃-459(Z-79)-2005(Z)；(2)扶正化瘀片：2005年获得国家新药证书(国药证字Z20050564)，并批准国家药品标准YBZ19332005-2009Z。扶正化瘀具有舒肝活血、益精养肝、化瘀解毒、软坚散结、增强机体免疫功能等作用，主治慢性乙型肝炎肝纤维化、早期肝硬化。

考虑到扶正化瘀制剂六味药材的有效成分性质差异较大，因此在生产过程中针对不同药味选用不同的提取方法。其中五味子和发酵虫草菌粉采用醇提工艺，具体如下：以约1g∶2g比例，取五味子和发酵虫草菌粉适量，用70％乙醇加热回流提取2次，第一次1.5h，第二次1h，合并提取液，浓缩至相对密度1.1-1.2(50℃-55℃)，得醇提中间体。根据该提取工艺，醇提中间体中主要含五味子木质素成分，以及发酵虫草菌粉中的核苷类成分。

近年来，指纹图谱技术已经成为中药复方质量控制与评价的重要手段，查阅国内外发表的文献，到目前为止没有扶正化瘀制剂醇提中间体指纹图谱分析的报道。因此本发明将弥补扶正化瘀制剂醇提中间体指纹图谱研究的空白。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种扶正化瘀五味子、发酵虫草菌粉中间体指纹图谱质量检测方法，该方法能全面控制扶正化瘀五味子、发酵虫草菌粉醇提中间体的质量，以确保产品的质量稳定。

本发明的一种扶正化瘀五味子、发酵虫草菌粉中间体指纹图谱质量检测方法，包括：

(一)检测方法A

(1)五味子、发酵虫草菌粉醇提中间体供试品制备

称取五味子、发酵虫草菌粉醇提中间体1.00克，置10mL容量瓶中，加50％甲醇5～8ml，超声处理20min，加50％甲醇至刻度，摇匀，过0.45um微孔滤膜，取续滤液作为五味子、发酵虫草菌粉醇提中间体的供试品溶液；

(2)梯度洗脱流动相

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，梯度洗脱条件为：

  时间(min)  A相：0.05％磷酸-水(％)  B相：乙腈(％)  0  95  5  60  60  40  120  10  90

色谱柱C18柱，流动相A相为0.05％磷酸-水，B相为乙腈；梯度洗脱：A相0-60-120min，95-60-10％、B相5-40-90％，流速0.8-1.2ml/min，检测波长254nm，柱温20-40℃，进样量10-20ul；

(二)检测方法B

(1)五味子、发酵虫草菌粉醇提中间体供试品制备

称取五味子、发酵虫草菌粉醇提中间体0.50克，置10mL容量瓶中，加水5～8ml，超声处理20min，加水至刻度，摇匀，过0.45um微孔滤膜，取续滤液作为五味子、发酵虫草菌粉醇提中间体的供试品溶液；

(2)梯度洗脱流动相