[发明专利]GPR116基因及其编码的受体蛋白和应用

权利要求书

1.一种分离出的DNA分子，其特征在于，它包括：编码具有人GPR116蛋白质活性的多肽的核苷酸序列，而且所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.1中从核苷酸第290-4330位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在中度严紧条件下与SEQ ID NO.1中从核苷酸第290-4330位的核苷酸序列杂交。

2.如权利要求1所述的DNA分子，其特征在于，所述的序列编码具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的多肽。

3.如权利要求1所述的DNA分子，其特征在于，该序列具有SEQ ID NO.1中从核苷酸第290-4330位的核苷酸序列。

4.一种载体，其特征在于，它包含权利要求1所述的DNA。

5.一种由权利要求4所述载体按照经典生物学方法转染和转化的宿主细胞，包括原核细胞和真核细胞。

6.一种用于PCR扩增GPR116全长的引物，具有如SEQ ID NO.12和13所示的序列。

7.一种用于构建针对GPR116的siRNA表达载体的人工合成寡核苷酸序列，具有如SEQ ID NO.8和9所示的序列，和用于构建针对与哺乳动物无序列同源性的对照siRNA表达载体的人工合成寡核苷酸序列序列，具有如SEQ ID NO.10和11所示序列。

8.一种用于合成针对GPR116的发夹siRNA的寡聚核苷酸序列，具有如SEQ ID NO.4和5所示序列，和用于合成与哺乳动物无序列同源性的对照发夹siRNA的寡聚核苷酸序列，具有如SEQ ID NO.6和7所示序列。

9.GPR116基因作为乳腺癌诊断标志物的应用，其特征在于：恶性乳腺癌细胞中GPR116强表达，而良性乳腺癌细胞中GPR116低表达，正常乳腺组织细胞中无GPR116表达。GPR116表达强度的无、弱和强的定义用光密度数值划分，把光密度数值小于0.1的定义为无表达，0.2-0.5之间为弱表达，大于0.5的为强表达。由于GPR116的N末端能被水解酶水解成很多片段，释放进入血液，因此病人的血清也可以作为利用GPR116诊断其乳腺癌测试样品之一。

10.一种用于诊断和治疗乳腺癌的生物芯片，其特征在于：所述生物芯片的载体上含有下列序列：

(I)-(iv)的序列或者它们的连续片段，

(i)SEQ ID NO：1所示的编码序列；

(ii)与SEQ ID NO：1中的290-4330位核苷酸序列至少有70％同源性的序列；

(iii)在中度严紧条件下与SEQ ID NO：1中的290-4330位核苷酸杂交的序列；

(iv)具有与SEQ ID NO.2所示氨基酸序列至少70％同源性的序列；

11.一种多核苷酸序列在制备治疗乳腺癌的药物中的应用，其特征在于，所述的多核苷酸是具有SEQ ID NO：1所示的编码序列，或者与SEQ ID NO：1中的290-4330位核苷酸序列至少有70％同源性的序列，或者在中度严紧条件下与SEQ ID NO：1的290-4330位核苷酸序列杂交的序列。

12.如权利要求12所述的一种多核苷酸序列在制备治疗乳腺癌的药物中的应用，其特征在于，所述的多核苷酸编码具有SEQ ID NO：2所示氨基酸序列的多肽。

13.一种筛选用于治疗或预防乳腺癌的化合物的方法，所述方法包括以下步骤：

a)使候选化合物与表达GPR116的细胞接触。

b)选出这样的候选化合物，其中，与不存在该候选化合物时检出的GPR116的表达水平相比，该候选化合物降低GPR116的表达水平。

14.权利要求10的方法，其中所述细胞包括乳腺癌细胞。

15.一种筛选用于治疗或预防乳腺癌的化合物的方法，所述方法包括以下步骤：

a)使候选化合物与导入了载体的细胞接触，其中所述载体含有GPR116的转录调控区及在该转录调控区的调控下表达的报告基因。

b)测定所述报告基因的表达水平或活性。

c)选择这样的候选化合物，该候选化合物降低所述报告基因的表达水平或活性。