[发明专利]翼首草总皂苷有效部位提取物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属中药制药领域，涉及翼首草总皂苷有效部位提取物及其制备方法和应用。

背景技术

翼首草为藏医常用药材，广泛应用于藏药制剂，如十二味翼首散、洁白丸、二十五味甘子丸、二十五味驴血丸、二十六味余甘子丸、九味青鹏散、石榴普安散、清肺止咳丸等。藏医认为翼首草性寒、味苦、有小毒，具有清热解毒、祛风湿、止痛的作用，可用于治疗瘟毒、痹证、痢疾、关节炎等症。目前，有关翼首草研究与应用的报道较少，与其相关的文献有：

文献[1]：一种药物组合物及其制备方法和用途，专利号：200310104142.4；

文献[2]：Two triterpenoid saponins from Pteroccephalus bretschneidri.Phytochemistry，1993，32(6)：1539；

文献[3]：Triterpenoid saponins from Pteroccephalus hookeri.Phytochemistry，1993，32(6)：1535；

文献[4]：匙叶翼首花的化学成分.天然产物研究与开发，1999，12(1)：35-37；

文献[5]：匙叶翼首花的化学成分.云南植物研究，1995，17(1)：108-110；

文献[6]：藏药翼首草化学成分的研究，成都中医药大学学报，2002年25卷3期；

文献[7]：翼首草的抗炎作用与急毒实验研究，北京中医药大学学报，2004年27卷2期

文献[8]：藏药翼首草抗类风湿性关节炎作用与机理研究，成都中医药大学硕士学位论文，2002年

上述文献1中公开了一种药物组合物的制备，其中君药翼首草仅仅涉及了乙醇加热回流提取的简单处理，文献2-5涉及到基于实验室条件下，通过化学方法和波谱分析共得到16种三萜皂苷类成分，文献6中张艺等首次从翼首草中分离得到rivularicin，文献7中涉及到翼首草总皂苷抗炎镇痛的药效学研究。文献8中涉及到翼首草抗类风湿性关节炎(RA)作用与机理的探讨。综上所述，目前尚未见对于翼首草总皂苷有效部位的提取纯化研究及其在抗肿瘤方面的药效学研究报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：提供翼首草总皂苷有效部位提取物，同时，提供上述有效部位提取物的制备方法及其应用。

本发明以翼首草总皂苷的含量为指标，提供了总皂苷含量高、质量可控、稳定、药效显著的翼首草总皂苷提取物。本发明所述的翼首草总皂苷有效部位提取物，其主要成分为齐墩果烷型五环三萜皂苷，其总皂苷的含量在50-90％。通过下述方法和步骤制得：

(1)提取

翼首草根粉碎后，用50％-95％含水乙醇加热回流提取，将提取液浓缩备用；

(2)纯化

将上述所得的浓缩液进行大孔树脂吸附，用水淋洗除去杂质，再用40％-95％C₁-C₅的低级醇洗脱，将洗脱液浓缩至稠浸膏后真空干燥或除去低级醇后喷雾干燥，得提取物。

具体而言，本发明通过下述步骤制备翼首草总皂苷有效部位提取物：

将粉碎后的翼首草根用50％-95％含水乙醇热提3次，每次溶媒用量约为生药量的5-12倍，每次提取时间1-3h；提取液浓缩后进行大孔树脂吸附，本发明中，所述的大孔树脂为聚苯乙烯型多孔性吸附树脂，优选AB-8、X-5、HPD-100型大孔树脂等，用水淋洗除去杂质，再用40％-95％C₁-C₅的低级醇洗脱，本发明中，采用的低级醇为甲醇、乙醇、或丙醇等C₁-C₅醇类，将洗脱液浓缩至稠浸膏后真空干燥或除去低级醇后喷雾干燥，得本发明的翼首草总皂苷有效部位提取物，经含量测定，其总皂苷含量为50-90％。

本发明中，对上述所得翼首草总皂苷有效部位提取物进行含量测定：

以齐墩果酸为对照品，采用比色法测定翼首草提取物中总皂苷的含量。结果显示，所述翼首草提取物中其主要成分为齐墩果烷型五环三萜皂苷，总皂苷的含量在50-90％，达到有效部位的要求。

为进一步说明本发明提取物在制备抗肿瘤药物中的应用，对所制得的提取物进行了体外抑制人肿瘤细胞增殖实验，本发明中，优选人消化系统肿瘤细胞SMMC-7721，SGC-7901，BGC-823，GAS进行增殖实验。试验结果表明，本发明提取物在体外能显著抑制人胃癌(SGC-7901、BGC-823、GAS)、肝癌(SMMC-7721)等人消化系统肿瘤细胞的增殖。