[发明专利]优化的串连细胞因子及其在诱导多能性干细胞中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域的干细胞研究，具体涉及串连的密码子优化的人 源细胞因子，并将该细胞因子用于iPS细胞(induced Pluripotent Stem cells)的 诱导的技术。

背景技术

iPS(induced Pluripotent Stem cells)技术作为一个新兴的技术解决了胚胎干 细胞的来源的限制，并绕开了伦理的约束，为再生医学研究的提供了新的希望。 早期的iPS使用Oct3/4，Klf4，Sox2与Myc组合或Oct3/4，Klf4，Nanog与Lin28 组合。为了简化试验操作，提高iPS效率以及提高iPS的安全性，人们对iPS诱 导技术方面进行了诸多改进，主要可以分为以下几个方面：

1)减少细胞因子个数。Myc和Klf有导致细胞癌变的特性，使用较少的细 胞因子将会有更高的安全性。实验证明可以使用Oct3/4和Klf4(Kim，J.B.et al， Pluripotent stem cells induced from adult neural stem cells by reprogramming with two factors.Nature 454(2008)，646-50.该文献中文名为，使用两个重编程细胞因 子从小鼠神经干细胞中诱导多能干细胞。)，或者单独使用Oct3/4诱导出iPS(Kim， J.B.，et al.Oct4-induced pluripotency in adult neural stem cells.Cell 136(2009)，411-9. 该文献中文名为，Oct4在成体神经干细胞中诱导的多能性。)

2)使用同一载体表达多个诱导因子。在做iPS诱导的过程中，同时转染或 者感染多个诱导因子在实验操作上比较繁琐，特别使用质粒进行转染。多个研 究小组使用串联的基因进行iPS诱导(Carey，B.W.，et al.Reprogramming of murine and human somatic cells using a single polycistronic vector.Proc Natl Acad Sci U S A 106(2009)，157-62.该文献中文名为，用单个多顺反子载体重编程小鼠 和人体细胞。Gonzalez，F.，et al.Generation ofmouse-induced pluripotent stem cells by transient expression of a single nonviral polycistronic vector.Proc Natl Acad Sci USA 106(2009)，8918-22.该文献中文名为，通过瞬时表达一个单个非病毒多顺 反子载体来产生小鼠的iPS细胞。)。