[发明专利]猪巴氏杆菌病二价灭活疫苗及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及兽用生物制品领域，特别涉及一种猪巴氏杆菌病二价灭活疫苗。

背景技术

巴氏杆菌病是目前我国猪的主要的细菌传染病之一。

巴氏杆菌病是由多杀性巴氏杆菌感染引起的细菌性疾病，可引起败血症、肺炎。巴氏杆菌按荚膜分可分为A、B、D、E四种荚膜血清型。巴氏杆菌病世界各地都有发生，热带地区较为严重。目前已流行的巴氏杆菌病以A、B群为主，还有少量的D群。

巴氏杆菌可引起猪体的混合感染，其常常导致猪群出现高发病率和高死亡率，由于混合感染和滥用抗生素，导致一病多型、一病多症、一症多病的现象非常普遍，造成猪病日趋复杂，诊断难度越来越大，漏诊和误诊时有发生。抗生素药物的残留，使肉用动物在出口时面临不能通过的难题。所以，猪巴氏杆菌病的预防疫苗就显得更加重要了。

目前，市面上使用的控制巴氏杆菌病的疫苗只有分别预防巴氏杆菌荚膜A群、B群菌感染的活疫苗，并且只能够各自预防一种细菌感染。另外，现有巴氏杆菌疫苗是活的细菌疫苗，用活的细菌作为免疫原，存在一定的散毒情况。

因此，需要发明一种新的猪巴氏杆菌病疫苗以解决上述问题。

发明内容

本发明的主要目的之一在于基于现有技术的不足而提供一种可以预防由巴氏杆菌荚膜A群和B群菌所引起的细菌感染、免疫安全的猪巴氏杆菌病二价灭活疫苗。

本发明的另一个目的在于提供一种操作简便的制备猪巴氏杆菌病二价灭活疫苗的方法。

本发明提供一种猪巴氏杆菌病二价灭活疫苗，所述的猪巴氏杆菌病二价灭活疫苗包括抗原和佐剂：所述的抗原由已灭活的巴氏杆菌荚膜A群菌培养浓缩液和已灭活的巴氏杆菌荚膜B群菌培养浓缩液以等菌量混合而成，所述的抗原为75～85体积份数；所述的佐剂为氢氧化铝凝胶，所述的佐剂为15～25体积份数。

本发明猪巴氏杆菌病二价灭活疫苗，由于采用荚膜血清A、B型的多杀性巴氏杆菌菌种制备二价灭活疫苗，可以预防由两种不同荚膜血清型的多杀性巴氏杆菌引起的感染，临床上达到一针多防的效果，降低成本，而且不存在散毒的隐患，安全可靠。

作为本发明猪巴氏杆菌病二价灭活疫苗的优选实施方式，所述的巴氏杆菌荚膜A群菌的菌株为荚膜A群多杀性巴氏杆菌P71株。

作为本发明猪巴氏杆菌病二价灭活疫苗的优选实施方式，所述的巴氏杆菌荚膜B群菌的菌株为荚膜B群多杀性巴氏杆菌C44-1。

上述两个菌株的免疫原性强，适合作为生产菌株。

作为本发明猪巴氏杆菌病二价灭活疫苗的优选实施方式，所述的猪巴氏杆菌病二价灭活疫苗中还含有0.01％体积比的硫柳汞。硫柳汞是一种可以抑制霉菌的化学物质。防止疫苗生产和使用过程中受到霉菌污染。

本发明还提供一种猪巴氏杆菌病二价灭活疫苗的制备方法，所述的制备方法包括如下步骤：

(1)分别将巴氏杆菌荚膜A群菌和巴氏杆菌荚膜B群菌增殖，得到巴氏杆菌荚膜A群菌培养液和巴氏杆菌荚膜B群菌培养液；

(2)将步骤(1)增殖得到的巴氏杆菌荚膜A群菌培养液和巴氏杆菌荚膜B群菌培养液灭活；

(3)向灭活后的巴氏杆菌荚膜A群菌培养液和巴氏杆菌荚膜B群菌培养液分别加入氢氧化铝凝胶进行浓缩，在分别得到的浓缩液中，所述的氢氧化铝凝胶的体积份数为15～25，上述两种培养液的体积份数分别为75～85；

(4)将步骤(3)得到的巴氏杆菌荚膜A群菌培养液浓缩液和巴氏杆菌荚膜B群菌培养液浓缩液按等量菌数进行混合，得到猪巴氏杆菌病二价灭活疫苗。

本发明猪巴氏杆菌病二价灭活疫苗的制备方法，操作简便，制备得到的产品能够预防由两种不同荚膜血清型的多杀性巴氏杆菌引起的感染，临床上达到一针多防的效果，降低成本，而且不存在散毒的隐患，安全可靠。

作为本发明猪巴氏杆菌病二价灭活疫苗的制备方法的优选实施方式，灭活方式为在步骤(1)增殖得到的巴氏杆菌荚膜A群菌培养液和巴氏杆菌荚膜B群菌培养液中，按总体积分别加入0.2％的甲醛溶液，放置于37℃灭活24小时，其间搅拌3～5次。

作为本发明猪巴氏杆菌病二价灭活疫苗的制备方法的优选实施方式，所述的巴氏杆菌荚膜A群菌的菌株为荚膜A群多杀性巴氏杆菌P71株。

作为本发明猪巴氏杆菌病二价灭活疫苗的制备方法的优选实施方式，所述的巴氏杆菌荚膜B群菌的菌株为荚膜B群多杀性巴氏杆菌C44-1。

上述两个菌株的免疫原性强，适合作为生产菌株。