[发明专利]用于废弃胚胎囊胚发育的培养液及培养方法

权利要求书

1.一种用于废弃胚胎囊胚发育的培养液，其特征在于，所述培养液是在商品化的胚胎培养液G2.5的基础上加入以下成分：

1000u/ml的白血病生长抑制因子；以及

10ng/ml的碱性成纤维生长因子。

2.一种用于废弃胚胎囊胚发育的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

A.取得保存在胚胎库中的在体外授精或单精注射后第三天的不适宜进行胚胎移植或冷冻的低质量胚胎；

B.将该胚胎置于如权利要求1所述的培养液中进行培养，培养每天观察胚胎发育情况，记录囊胚形成率并对形成的囊胚进行分级，分级方法参照Gardner等人的囊胚分级法；

C.将胚胎培养至第7天，发育到囊胚，选取可见内细胞团的囊胚，然后将该囊胚用于建立胚胎干细胞系。

3.根据权利要求2所述的培养方法，其特征在于，步骤B的操作方法包括以下步骤：

(1)用移液枪取如权利要求1所述的培养液，在35mm的培养皿中做35μl的微滴，覆盖矿物油，37℃、5％CO₂、饱和湿度培养箱内平衡过夜；

(2)将废弃胚胎转到上述培养液微滴中培养3-4天，每天观察胚胎发育情况直至第7天，并且对形成的囊胚进行分级，分级方法参照Gardner等人的囊胚分级法。