[发明专利]用于抑制肿瘤和防治转移及复发的茯苓多糖组合物与应用

说明书

技术领域

本发明属于中药制药技术领域，涉及具有治疗肿瘤和抑制肿瘤转移及术后复发活性 的茯苓多糖组合物及其制备方法以及在制备药物中应用。更具体的说是通过分级醇沉将 不同分子量的茯苓多糖分开，制备具有激活多形核白细胞，提高其杀伤肿瘤细胞能力而 发挥治疗肿瘤和防治肿瘤转移及术后复发作用的药物。

背景技术

茯苓多糖(Pachymaran)来源于多孔菌科真菌茯苓(Poriacocos Wolf)。茯苓是我 国传统的中药材，被视为“中药八珍”之一，味甘、平，入心脾、胃、肾经，有健脾健 肾、宁心安神等功效。现代药理学作用表明，茯苓多糖能增强人体免疫功能，提高人体抗 病能力，起到防病、延缓衰老的作用。

以往研究表明，茯苓核中抗肿瘤作用的有效成分为β-茯苓聚糖(β-Pachyman)，约 占茯苓核干重的93％，β-茯苓聚糖转化成为β-茯苓多糖(β-Pachymaran)才具有活性。茯 苓聚糖(pachyman)是含有少量β-(1→6)葡聚糖支链的β-(1→3)-D-葡聚糖，无抗肿瘤 活性。经化学修饰切去茯苓聚糖分子主链上的β-(1→6)葡聚糖支链后，得到β-(1→3)-D -葡聚糖称为茯苓多糖(pachymaran)，茯苓多糖经羧甲基化得到溶于水的羧甲基茯苓多糖， 具有较强的抗肿瘤活性，能减轻癌症患者放、化疗的毒副反应，并使患者的免疫功能得到 改善。

选择适合茯苓的提取方法，最大限度的提取茯苓的有效成分是研究茯苓药理作用的 基础。现有两种最新的提取方法，能使水溶性多糖的提取率得到明显的提高，即采用微 波技术提取法和复合酶热水浸提法提取法。前者与传统的萃取方法相比，具有选择性高、 操作时间短、溶剂消耗量少、有效成分得率高、适合于热不稳定成分等优点，而且作为吸 收微波最好介质的水也是中药提取的主要提取剂。后者由于酶的作用具有专一性，不会破 坏茯苓多糖的结构，且蛋白酶可降解获荃中所含蛋白质，从而使杂质含量低，可以在较 低的温度下提高多糖的提取率。

茯苓多糖抗肿瘤的作用是通过以下方式来体现的：

1.茯苓多糖对细胞膜磷脂酰肌醇(PI)转换具有明显抑制作用。近年来发现，某些肿瘤 细胞的PI转换增强，癌基因编码产物如EGF、PDGF、TGF等能促进细胞的PI转换，许多癌基 因在肿瘤形成早期，PI激酶活性也增加，抑制和干扰PI转换，则可影响肿瘤生长发育。因此， 茯苓多糖通过对PI转换的影响可产生抑制肿瘤细胞的作用。

2.肿瘤细胞膜磷脂的脂肪酸组成明显改变，主要是花生四烯酸比例升高，花生四烯酸 在自由基攻击下发生过氧化发应的产物具有促进肿瘤发生和生长的作用。茯苓多糖可以 改变其磷脂的脂肪组成，降低花生四烯酸和豆蔻酸的含量，从而发挥抗肿瘤作用。茯苓多 糖还可通过升高肿瘤细胞膜上的唾液酸量，影响细胞表面电荷特性，细胞膜的物质转运， 抗原决定簇的暴露以及改变免疫细胞的活化膜表面受体的功能，从而发挥抑制肿瘤细胞 增殖的作用。

3.茯苓多糖可通过抑制肿瘤细胞DNA、RNA的合成发挥直接杀伤肿瘤细胞的作用

4.激活机体的免疫监视系统也是茯苓多糖发挥抗肿瘤作用的主要机制已有实验表 明证明茯苓多糖可在体内外促进细胞因子的释放，对抗化疗药物对细胞因子的抑制作用。 可诱导T淋巴细胞产生IL-2、IL-6、IFN-a、IFN-g、TNF、LT、LR等，并能提高某些因子 的活性。IL-2能诱导TH细胞和TC细胞增殖，增强NK细胞及淋巴因子活化的杀伤细胞(LAK) 的活性，茯苓多糖还能增强巨噬细胞识别功能，提高巨噬细胞的吞噬指数，并能通过增强 TNF基因的转录而增强巨噬细胞释放TNF，并增强其活性。TNF不仅直接参与单核细胞对肿 瘤细胞的杀伤，而且能通过抑制基因转录活性，特异地降低myc基因mRNA的表达水平，使人 白细胞抗原(HLA)的mRNA表达水平升高，增强细胞免疫尤其是细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活 性，间接发挥杀伤肿瘤细胞的作用。

5.增强脾、胸腺功能，对抗肿瘤及化疗药物对胸腺、脾脏的抑制脾、胸腺乃至骨 髓都是人体重要的免疫器官，在肿瘤患者中多会出现脾及胸腺的功能低下，而放疗、化疗 又对脾、胸腺及骨髓功能有不同程度的抑制。茯苓多糖在保护与提高脾、胸腺功能，增加 脾、胸腺指数方面的作用已为多数体内外实验证实。