[发明专利]一种制备枯草芽孢杆菌的方法

权利要求书

1.一种制备枯草芽孢杆菌的方法，包括以下步骤：

步骤1：将第一液体培养基调pH值为6.5～7.5，高温灭菌后冷却至室温， 接种活化的枯草芽孢杆菌菌种，培养20～40小时，得液体菌种备用，所述第 一液体培养基为马铃薯蔗糖培养基或牛肉汁蛋白胨培养基；

步骤2：将第二液体培养基高温灭菌后冷却至室温，按培养基体积的3％ 接种步骤1所得液体菌种，搅拌并通气，在无菌状态培养24～35小时，得种 子液备用，所述第二液体培养基的配方为玉米粉∶大豆粉∶水的重量比为1∶ 2-3∶150-200，或玉米粉∶大豆粉∶葡萄糖∶水的重量比为1∶2∶1∶200；

步骤3：将麸皮60％-70％、稻草粉20％-30％、玉米粉10％-20％混合均匀配 制成固体培养基，经高温灭菌后，降温至室温，在无菌状态接种步骤2所得 种子液并进行培养；

步骤4：将步骤3所得培养物在无菌状态、35℃进行固体发酵培养72～ 90小时，干燥后，即得到本发明所述枯草芽孢杆菌。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤1至3所述培养的培 养温度为28℃～30℃。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤2所述通气的通气量为 1∶1～1.5。

4.按照权利要求1所述方法，其特征在于，步骤2中所述接种浓度为 0.6×10⁹个芽孢/毫升。

5.按照权利要求1所述方法，其特征在于，步骤3的接种量为所述培养 基重量的3％～10％。

6.按照权利要求1所述方法，其特征在于，步骤4所述干燥在0℃-50 ℃进行。

7.按照权利要求1所述方法，其特征在于，步骤1-3中所述高温灭菌为 120～130℃灭菌30-40分钟。