[发明专利]脐带华通胶来源的间充质干细胞在急性心肌梗死细胞移植治疗中的应用有效
| 申请号: | 200910170249.6 | 申请日: | 2009-09-09 |
| 公开(公告)号: | CN101642469A | 公开(公告)日: | 2010-02-10 |
| 发明(设计)人: | 高连如;张宁坤;陈宇;杨晔;丁青艾;朱智明;曹毅 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军海军总医院 |
| 主分类号: | A61K35/12 | 分类号: | A61K35/12;A61P9/10;C12N5/08 |
| 代理公司: | 北京知本村知识产权代理事务所 | 代理人: | 周自清 |
| 地址: | 10004*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 脐带 华通胶 来源 间充质 干细胞 急性 心肌梗死 细胞 移植 治疗 中的 应用 | ||
1.脐带华通胶来源的间充质干细胞在制备治疗急性心肌梗死细胞移植材料 的应用;
所述脐带华通胶来源的间充质干细胞是按以下方法制备的:取人新鲜脐带, 以等渗的平衡盐溶液或无血清培养基洗去脐带残留血液,去除脐动脉、脐静脉及 脐带外膜,剥离华通胶并剪切成小块,再以等渗的平衡盐溶液或无血清培养液冲 洗后,浸泡于0.05-0.3%胶原酶溶液中,置于35-37.5℃温箱中10-30小时, 组织块消化,液体呈粘稠状,然后加入相当于原液1-10倍量的含胎牛血清的培 养基终止消化,分装于培养瓶或培养皿,置CO2培养箱,待细胞贴壁后更换含胎 牛血清的培养基溶液,以后每隔2~4天换液一次,细胞贴壁融合后传代培养;传 代培养2~4代,即时使用或冷冻保存备用。
2.根据权利要求1所述的脐带华通胶间充质干细胞的用途,其特征在于, 应用冷冻保存的脐带华通胶间充质干细胞制备细胞移植材料的方法是,从低温容 器中取出冻存的细胞迅速放入35-38℃温箱及水浴箱中,2分钟内溶化,使用完 全培养基溶液重悬细胞,培养2-4天细胞融合后重新消化、洗涤细胞,用肝素 氯化钠注射液制成细胞浓度为1-2×106/ml的脐带华通胶间充质干细胞悬液。
3.根据权利要求2所述的脐带华通胶间充质干细胞的用途,其特征在于, 用以悬浮细胞的肝素氯化钠注射液,其配比为:肝素1000单位:生理盐水100 毫升。
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