[发明专利]诊断沙眼衣原体、淋球菌及解脲支原体感染的荧光PCR方法

权利要求书

1.以下(1)中所述的寡核苷酸序列和(2)中所述的寡核苷酸序列探针在制备用于检测沙眼衣原 体(CT)、淋球菌(NG)及解服支原体(UU)的荧光PCR核酸检测试剂盒中的用途，

(1)与CT/NG/UU DNA互补的寡核苷酸序列，其用作PCR扩增临床样品中获得的DNA的引物；所 述引物序列包括：

(a)一个能与CT基因对应的靶序列上游第一个位点杂交的正向引物，其中所述正向引物序列为 SEQ ID No.4；

(b)一个能与CT基因对应的靶序列下游第二个位点杂交的反向引物，其中所述反向引物序列为 SEQ ID No.5；

(c)一个能与NG基因对应的靶序列上游第一个位点杂交的正向引物，其中所述正向引物序列为 SEQ ID No.6；

(d)一个能与NG基因对应的靶序列下游第二个位点杂交的反向引物，其中所述反向引物序列为 SEQ ID No.7；

(e)一个能与UU基因对应的靶序列上游第一个位点杂交的正向引物，其中所述正向引物序列为 SEQ ID No.8；

(f)一个能与UU基因对应的靶序列下游第二个位点杂交的反向引物，其中所述反向引物序列为 SEQ ID No.9；

(2)用于检测CT/NG/UU的荧光标记的一个或多个寡核苷酸序列探针，该探针能与位于靶序列中 上述第一和第二个杂交位点之间的序列杂交，探针序列是SEQ ID No.1-3的序列或其互补序列，

所述试剂盒对取得的样品进行了PCR扩增，其特征在于包括一对或多对引物及探针，以CT、NG 或UU DNA作为模板，一个反应体系中扩增一个或多个DNA目标靶序列片段，通过检测PCR反应体 系中一个或多个不同荧光信号的变化，确定样品中是否存在CT、NG、UU或其组合，以及其含量。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于所述用于多重检测的荧光标记的探针为TaqMan或 Molecular Bacon探针，标记探针5′端的为一种荧光报告基团，3′端为一种荧光淬灭基团，探针的3′端 可以是带有DNA小沟复合物(MGB，Minor Groove Binder)修饰。

3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于所述荧光报告基团为FAM、TET、JOE、VIC、HEX、 ROX、TAMRA、CY3、CY3.5、CY5、CY5.5、Oregon Green、CAL Red、Red 640或Texas Red； 所述荧光淬灭基团为TAMRA、DABCYL、ECLIPSE或NFQ。

4.根据权利要求2或3所述的用途，可使用一个或多个荧光标记的探针，所标记的荧光报告基团可 以为一种或多种。