[发明专利]一种破酵母细胞细胞壁的方法无效
| 申请号: | 200910154651.5 | 申请日: | 2009-11-23 |
| 公开(公告)号: | CN102071151A | 公开(公告)日: | 2011-05-25 |
| 发明(设计)人: | 吴菁;史利斌 | 申请(专利权)人: | 湖州来色生物基因工程有限公司 |
| 主分类号: | C12N1/16 | 分类号: | C12N1/16;C12N1/18;C12N1/06;C12R1/865 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 313100 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 酵母 细胞 细胞壁 方法 | ||
技术领域
本发明是一种新的酵母菌破壁方法,涉及碱法、变温法及盐法破细胞壁的方法。
背景技术
我国啤酒工业发展迅速,2005年我国啤酒产量3061.56万吨,随着啤酒工业的飞速发展也带来了大量的副产物-啤酒酵母。酵母细胞中含有丰富的蛋白质、B族维生素、脂肪、糖和酶等多种营养成分和某些协调因子、并具有众多生理功能在饲料工业中被受关注,然而酵母细胞有比较坚实的细胞壁,其细胞内的物质不易释放出来,不能被动物很好的吸收利用。为此国内外学者进行了大量的试验研究,以期找到理想的破壁方法。目前,关于啤酒酵母的研究很多,大体可以归纳为:化学破壁法(酸解、碱解)、物理破壁(液体剪切、固体剪切等)、生物破壁(酶解、自溶)。本发明采用多种方法相结合的方法大幅度的提高了破壁效率,且操作简单、设备要求低。非常适合啤酒废酵母的破壁再利用。
发明内容
本发明提供了一种新的酵母细胞破壁方法
(1)酵母细胞预处理
废酵母细胞用无菌水稀释,所得溶液用70目分子筛筛分二次,再用90目分子筛筛分二次,将所得溶液离心分离10min,得到纯净的酵母细胞。
(2)利用碱法初步破碎酵母葡聚糖层
配制酵母、氨混合菌悬液,其中酵母浓度为10%,氨浓度为1%,将菌悬液放入60℃恒温水槽中水浴加热30min。所得溶液离心分离(3600n/min)10min,得到酵母沉淀。
(3)利用变温法与盐法结合二次破碎酵母细胞壁
所得酵母沉淀再用10倍无菌水稀释,用HCl调节PH至6.5,速冻至零下20℃,冷冻20min,然后用微波炉微波解冻,再100ml水加2.5克NaCl往溶液中加一定量的食盐,将混合液放入70℃恒温水槽中,加热2.5h,重复以上步骤3次。
本发明采用碱法、盐法和变温法3种破壁方法相结合的方法多层次破碎细胞壁,破碎率高。该法原料易得,设备要求低,操作简便。在工业化大生产中很好的应用前景。
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