[发明专利]淋病抗原唾液快速检测试纸条

说明书

技术领域

本发明涉及生物诊断技术领域，尤其涉及一种淋病抗原唾液快速检测试纸条。

背景技术

淋病(gonorrhea)是淋病奈瑟菌(简称淋菌)引起的以泌尿生殖系统化脓性感染为主要表现的性传播疾病，是一种古老而又常见的性病。近年来发病率居我国(中国)性传播疾病首位，淋菌为革兰氏阴性双球菌，呈肾型，成双排列，离开人体不易生存，一般消毒剂容易将其杀灭，多发生于青年男女。

解放前，我国一些城市的淋病发病率为20％左右。解放后在1953年早期病人已近绝迹，1960年基本上完成了晚期病人的普查普治，1964年已基本消失淋病。由于淋病是世界各国发病率最高的性传播疾病，接触者感染率高，潜伏期短，可在短期内病例成倍增长。又由于1976年西非和东亚出现了耐青霉素的淋球菌菌株以来，世界淋病有明显增加的趋势。我国自1975年以后，淋病又死灰复燃，病人逐年呈直线增多，是性病主要发病病种。如上海地区性病就以淋病为主，约占90％以上。

淋病的病原体即奈瑟菌，是1879年由Neisseria首次分离出的淋病双球菌，因而淋病双球菌又称为奈瑟双球菌(Neisseria gon-orrhoeas)。淋病双球菌呈肾形，两个凹面相对，大小一致，长约0.7微米，宽0.5微米。它是嗜二氧化碳的需氧菌，革兰染色阴性，最适宜在潮湿，温度为35℃，含2.5-5％二氧化碳的环境中生长。常存在多核白细胞内，椭圆或球形，常成双排列，无鞭毛、无荚膜、不存在芽孢，对外界理化条件的抵抗力差，最怕干燥，在干燥环境中1-2小时即可死亡。在高温或低温条件下都易致死。对各种化学消毒剂的抵抗力也很弱

目前，检测淋病最常用的方法是免疫检测，此方法以抗原-抗体的特异性识别为基础，包括传统的酶联免疫吸附试验(ELISA)和近来兴起的胶体金法两种。胶体金法分为免疫层析和免疫渗滤两种方式，其中以免疫层析法最为方便、快捷。

免疫层析胶体金技术是新型的诊断技术，已得到较为广泛的应用，基本原理如下：利用胶体金标记一种抗原或抗体，在试纸条的硝酸纤维素膜上包被相应的配对抗原或抗体，检测时当样品中含有相应的特异性抗体或抗原时，胶体金标记颗粒和样品中配体相结合形成复合物，然后在硝酸纤维素膜上层析，再被包被的抗原或抗体捕获，形成肉眼可见的检测线(T线)，通过检测线的有无实现对结果的判定。但现有的试纸条大多以血液为样品，不适合现场检测和自检，检测成本较高。

发明内容

本发明提供了一种淋病抗原唾液快速检测试纸条，该试纸条可以用唾液作为样品，解决了现有试纸条不适合现场检测，检测成本较高的问题。

一种淋病抗原唾液快速检测试纸条，包括底板，底板上依次粘贴有样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜以及吸样垫，所述的胶体金垫上附着有胶体金标记的可与淋病抗原特异性结合的第一单克隆抗体，所述的硝酸纤维素膜上包被有由第二单克隆抗体构成的检测线以及由可与第一单克隆抗体特异性结合的二抗抗体构成的质控线，所述的第一单克隆抗体与第二单克隆抗体相配对。

所述的淋病抗原是医学上检测人体是否感染淋菌的标记物，该标记物大量存在于人体血液当中，在人唾液当中也有少量存在。所述的第一单克隆抗体、第二单克隆抗体以及二抗抗体均可以通过商业购买或者通过现有方法制备得到。所述的第一单克隆抗体与第二单克隆抗体相配对是指上述两种单克隆抗体与淋病抗原的两个不同抗原决定簇结合。

所述的胶体金垫上附着有0.12～0.25μg/cm²的可与淋病抗原特异性结合的第一单克隆抗体，在该浓度范围满足唾液中淋病抗原检测的灵敏度要求。

所述的胶体金垫制备方法如下：

取胶体直径为15～35nm的胶体金溶液，调节pH值至8.0～8.2，以每100ml胶体金溶液计，加入0.5～1.0mg的第一单克隆抗体，搅拌后用牛血清蛋白封闭，离心去上清液，加入相同体积的胶体金溶液复溶，将每毫升溶液铺在40cm²玻璃纤维膜上，干燥后制得胶体金垫。

所述的检测线中所述的第二单克隆抗体的含量为0.05～1.1μg/cm；所述的质控线中所述的二抗抗体含量为0.05～1.1μg/cm。在该浓度范围唾液中淋病抗原检测的灵敏度要求。

所述的检测线包被方法如下：

将所述的第二单克隆抗体溶解在磷酸缓冲溶液中制得浓度为0.05～1.0mg/ml溶液，利用该溶液以1～1.5μl/cm的用量在硝酸纤维素膜的一端划线，干燥后即得检测线；

所述的质控线包被方法如下：